弹力纤维较细,直径0.2-1微米,且坚固,弹性大,容易伸展,纤维分枝连接成网,没有原纤维,量少时不易与胶原纤维区分,量多时才可识别。HE染色与胶原纤维着色相似,若用弹力纤维染色法,则可分辨的很清楚。例如,观察血管弹力层的异常。
弹力纤维具强嗜酸性,用升汞,酒精固定染色较佳,适于福尔马林固定。
操作方法:
1. Weigert氏弹力纤维染色法:
(1) 标本用Zenker氏液,酒精或10%甲醛固定均可。
(2) 石蜡或冰冻切片。
(3) 染色前的程序,按照常规进行。
(4) 水洗后,入Weigert氏染色液2-6小时或更长的时间,一般依染色液的新旧而定 。
(5) 切片从染液中取出,直接浸入1%盐酸酒精或酒精中进行分化。
(6) 如需复染细胞核,可染于明矾苏木素溶液中10分钟。
(7) 冲洗后,可再以Ven Gieson氏染液作对比染色1-2分钟。
(8) 95%酒精分化、脱水、透明、封固。
结果:弹力纤维呈暗蓝色,细胞核呈蓝色,胶原纤维呈红色,肌纤维呈黄色。
注意事项:
Weigert氏弹力纤维染色的配制已有许多改变,盐基性复红(碱性品红)可由其它盐基性染料取代,如甲紫、焦油紫(结晶紫)、维多利亚兰等。配制时如将结晶紫1克加盐基性复红1克,则弹力纤维染成兰绿色;全用甲紫或结晶紫,弹力纤维则呈暗绿色。亦有将染液以酒精加倍稀释,并相应增加盐酸量,之后延长染色时间,染色时间可达数小时甚至过夜,对纤细的弹力纤维显示更好。
试剂配制:
盐基性复红(碱性品红) 1g
间苯二酚(雷锁辛) 4-5g
蒸馏水 200ml
29%三氯化铁水溶液 25ml
95%酒精 200ml
浓盐酸 4ml
先将盐基性复红(碱性品红)溶于200ml的蒸馏水中,加入4-5g间苯二酚,加温煮沸(不停搅拌),然后加入25ml的29%三氯化铁水溶液,继续搅拌煮沸2-5分钟,冷却后过滤倾去滤液,将滤纸及沉淀物置于温箱中烘干。而后将滤纸和干燥的沉淀物一并投入烧杯,加200ml95%酒精,小心隔水加热,徐徐搅拌使沉淀溶解,然后弃去滤纸冷却后,补足因加热蒸发的酒精。最后加入4ml的盐酸即可应用。(对苯二酚可代替间苯二酚)。 上一篇:网状纤维染色法 下一篇:Verhoeff氏弹力纤维染色法