(一)固定的概念 应用各种方法使病理标本尽量保持其离体前状态的过程称为固定(fixation)。 病 理标本(样本)离体后,由于微环境的变化将发生自溶和(或)腐败,使其结构破坏。固定的目的和机制是:①使蛋白质凝固,终止或减少分解酶的作用,防止自 溶,保存组织、细
网站地图本站论坛
高级搜索收藏本站
  • 病理组织学常用制备技术-组织的固定

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2008-01-08    本站论坛
(一)固定的概念
应用各种方法使病理标本尽量保持其离体前状态的过程称为固定(fixation)。
病 理标本(样本)离体后,由于微环境的变化将发生自溶和(或)腐败,使其结构破坏。固定的目的和机制是:①使蛋白质凝固,终止或减少分解酶的作用,防止自 溶,保存组织、细胞的离体前结构状态,包括保存组织或细胞的抗原性,使抗原不失活,不发生弥散。②保存组织、细胞内的蛋白质、脂肪、糖原、某些维生素及病 理性蓄积物,维持病变的特异性特征。③使上述物质转为不溶解状态,防止和尽量减少制片过程中人为的溶解和丢失。④起助染作用。
固定方法有:①物理学方法,如低温冷冻,干冰(dry
ice,即固态无水碳酸)冰冻真空脱水,石蜡渗入法。②化学方法,采用各种化学溶液作固定液,使组织细胞进入固定状态。这是国内最常用的方法。
固定应在标本离体后尽快进行,小标本可在取材后直接放入固定液内,大标本应在手术结束前或结束后迅速放入固定液内。
固定液与标本的比例不得少于标本体积得5倍。有特殊要求者应事先选定相应得固定液,如欲查糖原,应选择无水乙醇作固定液等。
固定得时间应适当,微小标本(如胃粘膜等)2~4h即可,大标本应置放12~24h,但亦不要过久,以免影响抗原性,造成免疫组化操作中得困难。
(二)常用固定液及其配制
固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛(formaldehyde)
是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%~40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formalin)。用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10%福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2乙醇
无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3中性甲醛液(混合固定液)
甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4)13g。此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4AF液(混合固定液)
95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。也有配方是95%乙醇85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。

上一篇: 研究称子宫可人造 未来婴儿在流水线工厂问世?   下一篇:常规石蜡切片操作

推荐文章
 
相关文章
·常规石蜡切片操作
·实验室环境和人体表面微生物的检查
·人类的皮肤纹理分析
·肺炎:肺泡及其周围组织的感染
·谈谈引起食物中毒的病原微生物的总类及预防
·猪痘病、水疱病和口蹄疫的鉴别诊断
·引起腹泻的病原体
·疟原虫的培养方法
·宿主细胞对微生物入侵的反应
·临床实验室操作规程编写要求
·APTT操作规程一例(医学检验SOP)
·红细胞计数操作规程(一个检验SOP样版)
·血浆凝血酶原时间测定操作规程(检验SOP)
·生化标准化操作程序文件(SOP)模板 - 总二
·The Skin in Systemic Autoimmune Diseases
·The Weight Loss Cure They Don't Want You
·Sex and the Brain
·Cognitive Science Perspectives on Person
·When Babies Read: A Practical Guide to H
推荐专题
 

↑返回顶部   打印本页   关闭窗口↓  
 本站申明 联系我们 网站地图
Copyright© 试验方案

Powered by DedeCms email:htmyth#yahoo.com.cn

Optimized to 1024x768 to Firefox,Opera and MS-IE6