一、目的要求
1、证明实验室环境与体表存在微生物。
2、比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。
3、观察不同类型微生物的菌落形态特征。
4、体会无菌操作的重要性。
二、基本原理
平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分,当取自不同来源的样品接种于培养基上,在适宜温度下培养,1~2 d内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖,形成一个可见的细胞群体的集落,称为菌落。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点,例如菌落的大小、表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑,边缘整齐或不整齐,菌落透明、半透明或不透明,颜色以及质地疏松或紧密等。因此,可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。
三、器材
1、培养基 肉膏蛋白胨琼脂平板
2、仪器或其他用具 无菌水,灭菌棉签(装在试管内),接种环,试管架,酒精灯或煤气灯,记号笔,废物缸。
四、实验内容
每组在“实验室”和“人体”两大部分中各选择一个内容做实验,或由教师指定分配,最后结果供全班讨论。
1、写标签
任何一个实验,在动手操作前均需首先将器皿用记号笔做上记号,写上班级、姓名、日期,本次实验还要写上样品来源(如实验室空气或无菌室空气或头发等),字尽量小些,写在皿底的一边,不要写在当中,以免影响观察结果。
培养皿的记号一般写在皿底上,如果写在皿盖上,同时观察两个以上培养皿的结果,打开皿盖时,容易混淆。
2、实验室细菌检查
(1)空气 将一个肉膏蛋白胨平板放在当时做实验的实验室,移去皿盖,使琼脂培养基暴露在空气中,将另一肉膏蛋白胨琼脂平板放在无菌室或无人走动的其他实验室,移去皿盖。1 h后盖上两个皿盖。
(2)实验台和门的旋钮
①用记号笔在皿底外中央画一直线,再在此线中间处画一垂直线。
②取棉签 左手拿装有棉签的试管,在火焰旁用右手的手掌边缘和小指、无名指夹持棉塞(或试管帽),将其取出,将管口很快地通过酒精灯(或煤气灯)的火焰,烧灼管口,轻轻地倾斜试管,用右手的拇指和食指将棉签小心地取出。塞上棉塞(或试管帽),并将空试管放在试管架上(图1-1)。
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样品来源
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菌落数
(近似值)
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菌落
类型
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特 征 描 写
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大小
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形态
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干湿
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高度
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透明度
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颜色
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边缘
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1
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1
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2
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3
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4
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5
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2
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1
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2
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