细胞培养指南
细胞冻存: 当细胞状态好,或者代数比较早,一定要大量冻存,不要吝惜暂时的大批使用血清,当细胞状态不好,长不起来的时候,马上取出来复苏,省时省力,不要去尝试努力恢复状态不好的细胞,费时间也费血清,会令你痛苦不堪。另外冻存的细胞不要放到一个地方,-80度,液氮(甚至不同的液氮罐)都放一点,谁也不敢保证不出意外,冰箱也可能有化的时候(我们-20度冰箱就化过),都放在一块容易全军覆没。
按照试剂的保存标准保存,象血清、胰酶等没开封的-20℃,开封后-4℃保存一般不超过7天(用完它吧,不然浪费了)
5、一定要弄清楚每个组分的作用,特点,比如NaHCO3容易分解,因此培养基在过滤除菌时pH会上升,一般是0.1-0.3,所以在过滤之前,要把培养基的pH调低0.1-0.3。如果你不了解NaHCO3容易分解的特点,就不会做相应的处理,那么培养基不符和要求,细胞就长不好
台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况,用0.4%台盼蓝直接染色5-10分钟,在显微镜下观察即可,活细胞不被染色。方便易用,因此在实验室中比较常用,尤其在心肌细胞原代培养中。
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