利用抑制消减杂交技术筛选猪蛔虫性别差异表达基因

利用抑制消减杂交技术筛选猪蛔虫性别差异表达基因

为了筛选线虫的性别特异性基因，为线虫乃至寄生虫的性别控制提供新的工具，本研究选择猪蛔虫
（Ascaris suum）为模型，分别提取雌性和雄性成虫的mRNA 后，采用Clontech 公司的PCR-selectTM试剂盒进行
反转录合成cDNA 并进行抑制消减杂交（SSH），构建猪蛔虫雌、雄虫性别差异表达的消减cDNA 文库，并采用地高
辛（DIG）标记的cDNA 探针进行Southern 杂交检验所构建文库的消减效率。结果表明，雌、雄虫性别差异表达
的消减cDNA 文库均具有很强的性别特异性。随机从各库中各抽取25 个克隆进行测序及在线BLAST 分析，发现在
25 个雄虫ESTs 中有20 个已知ESTs，5 个新的ESTs；25 个雌虫ESTs 中有11 个已知ESTs，还有8 个可能为新基
因。猪蛔虫性别差异表达的消减cDNA 文库的成功构建，为进一步研究性别特异基因的功能奠定了基础。