中华绒螯蟹蜕皮抑制激素基因的表达及抗体制备
蜕皮抑制激素(Molt-inhibiting hormone,MIH)属于甲壳动物高血糖激素家族神经肽,对甲壳类的蜕皮起抑制作用.本研究用DNA重组技术将中华绒螯蟹(Eriocheir japonica sinensis)的蜕皮抑制激素1(Ers-MIH1)成熟肽的cDNA序列亚克隆至原核表达载体pET-28a( )中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行高效表达.SDS-PAGE检测结果显示,融合蛋白pET-MIH1的Mr约为12 kD,与理论值相符.融合蛋白的表达量约占菌体总蛋白的15%,表达产物以包涵体形式存在.对包涵体进行变性、复性及纯化处理,并以8 mol/L尿素溶解的包涵体作为免疫原免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体.ELISA和Western blot的结果表明制备的抗体效价高、特异性强
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