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流感病毒的鉴定——血球凝集抑制试验

点击： 作者：51protocol收集 来源： 时间： 2007-06-02 　本站论坛

流感病毒的鉴定——血球凝集抑制试验

【原理】
许多病毒能凝集鸡、豚鼠、人等红细胞，称为血凝现象。这种现象能被相应抗体所抑制，称血凝抑制试验。其原理是相应的抗体与病毒结合后，阻抑了病毒表面的血凝素与红细胞的结合。
【方法】
①取小试管10支（也可用塑料凹孔板），1~7管为实验管，第8管为血清对照，第9管为抗原对照，第10管为血球对照。
②于1~9管各注入生理盐水0.25毫升，第10管为0.5毫升。
③取1：10流感单价免疫血清于第1管及第8管各注入0.25毫等式逻辑，从第1管起作对倍稀释至第7管。弃去0.25毫升。
④依照表中顺序剂量分别加入病毒和鸡血球，摇匀后室温静置30~60分钟。30分，60分各观察结果一次，以60分钟结果为准。
【结果观察】
“-”表示不凝集，红细胞沉积于管底，呈边缘整齐的园盘状。
“ ”表示微量凝集。红细胞沉积于管底，呈边缘不清晰的园盘。
“ ”表示凝集，红细胞沉积于管底呈环状，四周有凝集的小块。
“ ”大部凝集，红细胞呈颗粒状凝集，边沿不整齐，有下垂趋势。
“ ”完全凝集，红细胞均匀铺于管底。
【效价判定】
对照管第8管应不凝集，第9管应完全凝集，第10管应不凝血，依次观察实验管，以能完全阻止血球凝集（“—”）的血清最高稀释度为血凝抑制效价。
【应用】
常用于正粘病毒及副粘病毒等感染的辅助诊断和流行病学调查，并用于其分型与亚型的鉴定。
血球凝集试验操作表（表中容量单位为ml）

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