一、目的要求:简要介绍石蜡切片的制作和苏木精、 曙红染色法(简称H.E染色法), 借以了解石蜡切片制作的基本原理和一般方法。 二、实验用具:解剖器一套、单面刀片、切片刀、切片机、载玻片、盖玻片、标本瓶、烧杯、量筒、漏斗、染色缸、树胶瓶、酒精灯、毛笔、绘图
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  • 石蜡切片法简介

  • 点击:    作者:51protocol收集   来源: 日期:2007-06-02    本站论坛

一、目的要求:简要介绍石蜡切片的制作和苏木精、 曙红染色法(简称H.E染色法),
借以了解石蜡切片制作的基本原理和一般方法。
二、实验用具:解剖器一套、单面刀片、切片刀、切片机、载玻片、盖玻片、标本瓶、烧杯、量筒、漏斗、染色缸、树胶瓶、酒精灯、毛笔、绘图纸、滤纸、熔蜡箱(或恒温箱)、展片台(或烫板)、小木块、蜡带盒、烤片盒、切片托盘。
三、实验材料:蛙或小白鼠。
四、实验内容:
(一)药品:
1、70%、80%、90%、95%酒精及无水酒精:
95%以下的各级浓度酒精是用95%酒精加蒸馏水稀释而成。简单的稀释方法:所需稀释的浓度是多少,就量取多少毫升原浓度的酒精,再加蒸馏水至该酒精的原浓度即可。例如,配制70%酒精,就量取70ml95%酒精,然后加入25ml蒸馏水即成。
2、固定液:
 常用的固定液有10%福尔马林、Bouin氏液和Zenker氏液等。Bouin氏液在组织学切片技术方面应用甚广,配方如下:
 苦味酸饱和水溶液 75ml
 福尔马林    25ml
 冰醋酸    5ml
3、蛋白甘油:
蛋白甘油是粘贴蜡片用的粘片剂。配方如下:取一新鲜鸡蛋的蛋白,充分搅拌成雪花状泡沫,然后滤去泡沫,加入等量甘油,搅拌均匀,再加入一小粒麝香草酚防腐。
4、染色液:
 以H.E.染色法为例,需配制苏木精染液和曙红染液。
⑴、苏木精染液:苏木精是一种碱性染料,它可将染色质染成蓝紫色。配方有多种,现介绍Harris氏苏木精的配制:
甲液: 苏木精     0.5 g
95%酒精     5.0 ml
乙液: 硫酸铝钾(或硫酸铝铵) 10g
  蒸馏水     100 ml
 氧化汞     0.25g
  冰醋酸     几滴
  先将甲液溶解,再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中,并加热使溶解,然后将两液混合煮沸,离开火焰后缓缓加入氧化汞。冷却后过滤,加入几滴冰醋酸即成。
⑵、0.5%曙红酒精溶液:即0.5g曙红溶于100ml95%酒精中。 曙红是一种酸性染料,它可使多种细胞的细胞质染成粉红色或红色。
5、盐酸酒精:
盐酸酒精用于分色。配制方法是在100ml70%酒精中加入1ml盐酸。
6、其它:
 二甲苯、切片石蜡、中性树胶等。

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