PCR/RT-PCR指南---PCR产物克隆(10)
网站地图本站论坛
高级搜索收藏本站
当前位置:试验方案>实验基础>基础操作> 正文
  • PCR/RT-PCR指南---PCR产物克隆(10)

  • 点击:    作者:51protocol收集   来源: 日期:2007-06-02    本站论坛

PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切与连接法,杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。
但因为TA克隆法操作最简单,快速和高效的原因,成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明,并拥有全球TA Cloning商标的专利权。

TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)

利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。Invitrogen公司TA克隆系统和Topo TA克隆系统都提供一个线性含3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。

所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理(Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆)。不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。

图32 The TA Cloning

上一篇:PCR/RT-PCR指南---PCR应用(9)   下一篇:PCR/RT-PCR指南---PCR扩增产物表达的快速方法(11)

推荐文章
 
相关文章
·PCR/RT-PCR指南---PCR应用(9)
·PCR/RT-PCR指南---PCR扩增产物表达的快速方
·PCR/RT-PCR指南---RT-PCR应用(4)
·PCR/RT-PCR指南---疑难解答(12)
·PCR/RT-PCR指南---其他需要考虑的事情(8)
·PCR/RT-PCR指南---相关产品(13)
·PCR/RT-PCR指南---提高忠实性(7)
·使用一步法RT-PCR从单一细胞中检测基因
·PCR/RT-PCR指南---增加PCR特异性(5)
·PCR/RT-PCR指南---测定PLATINUMTM pfx DNA
·PCR/RT-PCR指南---增加RT-PCR灵敏度(2)
·PCR/RT-PCR指南---增加PCR灵敏度(6)
·减少PCR产物中引物二聚体的方法
·PCR/RT-PCR指南---增加RT-PCR特异性(3)
·PCR/RT-PCR指南---PCR和RT-PCR基础(1)
·第八章 聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物
·PCR产物测序
·PCR详解(3)
·聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段
推荐专题
 

↑返回顶部   打印本页   关闭窗口↓  
 本站申明 联系我们 网站地图
Copyright© 试验方案

Powered by DedeCms email:htmyth#yahoo.com.cn

Optimized to 1024x768 to Firefox,Opera and MS-IE6