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  • SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法—蛋白质的分子量测定

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-04-09    本站论坛

⑵ 对于0.75mm的凝胶,可在摇床上缓慢震荡5分钟~l0分钟,对于1.5mm的凝胶,则需10分钟~20分钟,在染色和脱色过程中要用盖子或封口膜密闭容器口。弃去染液,将凝胶在水中漂洗数次。戴手套以避免将双手染色。
⑶ 加入考马斯亮蓝脱色液(约50ml),清晰的条带很快会显现出来,大部分凝胶脱色需要1h,使用过的脱色液则可用水冲洗掉。为了脱色完全,需数次更换脱色液并震荡过夜。
6.干胶
⑴ 用一张l0cm×l2cm的Whatman 3MM滤纸覆盖凝胶,用一张玻璃纸或塑料保鲜膜覆盖在凝胶的另一个表面,小心不要将气泡裹进去,这样会导致凝胶的破裂。可用一个试管作为卷轴推赶,可以有效的除去气泡。
⑵ 将滤纸置于干胶器上,开启加热和抽真空开关,并盖上带有密封圈的盖子。待凝胶烘干后小心取出即可。

实验结果
根据凝胶中标准品与待测样品的相对迁移率判断待测样品的大致分子量。

思考
⒈ 利用SDS—聚丙烯酰胺电泳法测定蛋白质的分子量与利用凝胶层析测定蛋白质的分子量有何不同?
⒉ SDS在该电泳方法中的作用是什么?


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