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  • 聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)分离血清蛋白质(核黄素-TEMED聚合系统)

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-04-09    本站论坛

5分钟(室温)
2小时(室温)
10分钟(96

5%乙醇
7%乙酸

考马斯亮蓝R250

2%磺基水杨酸
10%三氯乙酸
样品中含尿素的在5%

三氯乙酸中固定

0.25%R250水溶液
10%三氯乙酸-1%R250
191V/V
5%磺基水杨酸和1%R250
191

5分钟(室温)
0.5小时(室温)


1
小时(室温)

7%乙酸
10%三氯乙酸


90%
甲酸

考马斯亮蓝G250

6%乙酸
12.5%三氯乙酸

6%乙酸中1%G250
12.5%三氯乙酸中0.1%G250

10分钟(室温)30分钟(室温)

甲醇--浓氨
64361

1-苯胺基-8-萘磺酸

2mol·L-1盐酸浸几秒钟

pH6.8,0.1mol·L-1磷酸盐缓冲液中0.003%染料

3分钟

本实用0.5%氨基黑10B的乙酸液(7%乙酸)染色2h。
10.脱色及保存
氨基黑染色后的凝胶用水冲洗掉表面染料,放在7%乙酸中浸洗,经常更换新溶液,直到染料不再洗出,背景几乎无色为止,约需2—3天。
脱色后的凝胶放在7%乙酸中,可以长期保存。
五、结果分析
用凝胶成像系统或光密度计扫描进行各电泳区带的定量分析。


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