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  • 丙烯酰胺凝胶电泳实验

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-04-09    本站论坛
NN';四甲基乙二胺 DMAPNβ-二甲基胺基丙晴
  用过硫酸铵引发的反应称化学聚合反应;用核黄素引发,需要强光照射反应液, 称光聚合反应。 聚丙烯酰胺聚合反应可受下列因素影响:
1
、大气中氧能淬灭自由基,使聚合反应终止,所以在聚合过程中要使反应液与空气 隔绝。
2
、某些材料如有机玻璃,能抑制聚合反应。
3
、某些化学药物可以减慢反应速度,如赤血盐。
4
、温度高聚合快,温度低聚合慢。


以上几点在制备凝胶时必须加以注意。 凝胶的筛孔,机械强度及透明度等很大程度上由凝胶的浓度和交联决定。每100亳升 凝胶溶液中含有单体和交联剂的总克数称凝胶浓度,常用T%表达;凝胶溶液中交联剂 占单体和交联体总量的百分数称为交联度,常用C%表示,可用下式计算:

a:丙烯酰胺克数; b:甲撑双丙烯酰胺克数;m:缓冲液体积(毫升) 凝胶浓度过高时,凝胶硬而脆,容易破碎;凝胶浓度太低时,凝胶稀软,不易操作。

  交联度过高,胶不透明并缺乏弹性;交联度过低,凝胶呈糊状。 聚丙烯酰胺凝胶具有较高的粘度,它不防止对流减低扩散的能力,而且因为它具有三 度空间网状结构,某分子通过这种网孔的能力将取决于凝胶孔隙和分离物质颗粒的大 小和形状,这是凝胶的分子筛作用。由于这种分子筛作用,这里的凝胶并不仅是单纯 的支持物,因此,在电泳过程中除了注意电泳的基本原理以外,还必须注意与凝胶本 身有关的各种性质(网孔的大小和形状等)。可通过下式计算来选择适当的凝胶网 孔。

  式中:P为网孔平均直径,C为多聚体浓度,d为该多聚体分子直径(若不是卷曲的分 子应为5A),K为常数,K值取决于涨胶的几何构型,假如多聚体的链是以近似于直角 交联的,则约为

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