适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者
对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin) 配方:100ml PBS,0.25g胰酶 步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中,低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中 4 调PH7.4 5 仍在冰浴中 6 过滤,分装,-20℃保存,4℃短期内用完 tip:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫, 酶就变性了。低温,防止酶失活 对难消化的细胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%) tip:因为EDTA可以络合Ca2 ,增加消化效力
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