肿瘤的发生发展是一个较长的多步骤的过程。细胞凋亡异常在肿瘤发生发展过程中具有重要的病理生理意义, 研究细胞凋亡及其调控基因在癌变过程中的变化规律将有助于揭示癌发生的机制。检测凋亡的方法有多种,但它们的检测原理是共同的.即凋亡细胞的染色体和DNA裂解的寡核苷酸DNA可被DNA聚合酶和末端脱氧核酸转移酶（TDT）标记,这种方法能直接优先检测凋亡细胞,且方法特异.
TUNEL操作程序：
1、切片脱蜡至水;
2、3%H2O2封闭RT 10min;PBS液洗3x3min;
3、0.25%胃蛋白酶（用0.1N HCl作溶剂）37℃ 1h;
4、PBS液洗3x3min;
5、TUNEL液37℃ 1h;PBS液洗3x3min;
6、抗FITC-AKP(HRP) 37℃30min;
7、NBT/BCTP(DAB)显色;
8、核固红复染;
9、水洗凉干用水性封片剂封片.
阳性部位位于细胞核
TUNEL染色方法是一个比较简单易掌握的,在实验的过程中体会到（1）以0.25%胃蛋白酶代替蛋白酶K可以防止蛋白酶K的消化造成的脱片现象，同时也降低实验成本；（2）在进行NBT/BCIP显色时应做到避光显色以减少背景的着色，如果有条件的实验室有荧光显微镜最好不进行碱性磷酸酶的免疫标记及显色,采用荧光显微镜边观察边照相,得到更准确的标记物，而减少下面步骤带来的误差；（3）在进行实验过程中，用盖片覆盖试剂可以节省试剂的用量及防止试剂在孵育过程中试剂干涸。
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