| 基本原理
经绵羊红细胞（SRBC）免疫动物的淋巴细胞可产生抗SRBC抗体（溶血素）。并释放至外周血。这种抗体在试管内与SRBC温育．在补体参与下可产生溶血反应．免疫动物血清中溶血素的含量可以通过溶血过程中释放的血红蛋白来测出。
材料与仪器
l SRBC保存液（Alsever液）；葡萄糖2.05g，氯化钠 0.42g，柠檬酸钠 0.8g，蒸溜水100ml，无菌过滤（Ｇ５漏斗）或8磅10分钟灭菌后备用。
l 都氏试剂（测血红蛋白用）；碳酸氢钠 1.0g，高铁氰化钾 0.2g，氰化钾0.05g，蒸馏水1000ml。
l 补体：新鲜豚鼠（至少3只）混合血清经SRBC（10:1）于4℃吸收30分钟后置-20℃以下备用。
l SRBC：在无菌条件下，自健康成年绵羊外颈静脉取血，置血液于有玻璃珠的三角烧瓶中轻摇10分钟以除去纤维蛋白，加人2 倍量的保存液，置4℃冰箱备用。临用时用生理盐水洗涤3次，经2000rpm10分钟得压积红细胞，再按所需浓度稀释。
操作步骤
1. 免疫；小鼠腹腔注射20％SRBC 0.2ml／天，免疫后第4天去眼球或腹动脉取血，分离血清，将血清稀释（一般500倍以上）后供测定。
2. 溶血反应：反应管内依次加人经稀释的血清lml，5％SRBC0.5ml，10％补体lml．置
3. 37℃恒温水浴中保温30分钟，然后移至冰浴中终止反应，1500rpm离心5分钟，取血清液lml加都氏试剂3ml，摇匀放置10分钟，于540nm波长比色读取吸光度。
4. SRBC半数溶血值：取５％SRBC 0.25ml加都氏液至 4ml，比色读取吸光度值，即为实验中所用SRBC半数溶血时的吸光度值。
5. 计算：样品管中数溶血值 CH50按下式计算：
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每只鼠的血清CH50 =
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样品的吸光度值
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×稀释倍数
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SRBC半数溶血时的吸光度值
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注意事项
免疫用SRBC浓度可根据不同品系小鼠的敏感度和试验药物的作用强度作调整。
参考文献
刘辉 2000 研究生免疫学教程 大连 大连出版社 261－262
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