网站地图	本站论坛
高级搜索	收藏本站

热门关键字：　细胞培养　 pcr 　琼脂糖凝胶电泳　质粒DNA的提取　凝胶加样缓冲液　 PCR inventor

	当前位置：试验方案>蛋白试验>免疫学> 正文

天然免疫功能测定

点击： 作者： 来源： 时间： 2007-04-09 　本站论坛

2u补体（ml）
生理盐水（ml）

0.25
0.25
0.25
―

0.25
0.25
－
0.25

　0.25
－
0.25　　　　
0.25

0.25
－
－0.5

结果

（2）将上述试管放37℃水浴箱内，经30分钟取出，观察结果。
【结果】观察各管溶血情况。若红细胞悬液呈混浊状或放置后管底有红细胞沉积、上清液无色透明者，均为不溶血；若红细胞悬液变为红色透明的液体即为溶血现象。
记录所得实验结果，并加以分析。
（二）血清总补体溶血活性（CH₅₀）测定
绵羊红细胞（SRBC），与相应抗体（溶血素）结合后，可激活待检血清中的补体而导致SRBC溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关，但不是直线关系，而呈S曲线关系，故通常取反应曲线中间部位即50％溶血（CH₅₀）为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途径，C1～9任何一种成分缺陷都可使CH₅₀降低，所以此实验反映了总补体的活性。
【材料】磷酸缓冲盐水(pH7.4 PBS)、2%绵羊红细胞、溶血素（2单位）、待检血清、小试管、吸管、37℃水浴箱等。
【方法】
1、标准曲线的制备
(1)2%血红素溶液配制: 吸取5m1 2%绵羊红细胞悬液加入离心管中，2000rpm离心5分钟，去除上清，加蒸馏水2.5m1，待羊红细胞溶解后，再加1.7%NaCl溶液2.5m1，混匀，即为2%血红素溶液。
(2)取小试管11支，按表5-1分别加入各成分。
(3)混匀后2000rpm离心5分钟，取上清用分光光度计(波长540nm)测光密度值。
(4)以光密度值为纵坐标，溶血%为横坐标，绘出标准曲线。
2、待检血清测定
（1）取病人血清0.1ml，加PBS 3.9ml，使成1:40稀释，混匀后分装4个小试管，每管1ml。
（2）加2单位溶血素，每管lml。
（3）加2%绵羊红细胞，每管lml。
（4） 37℃水浴30分钟。
（5） 2000rpm离心5分钟
（6）取上清液测光密度值（540nm波长）。
表5-1 CH50测定的标准曲线制备

试管号

上一篇：凝集反应(agglutination 下一篇：沉淀反应（Precipitation）实验

共4页: 上一页 [1] 2 [3] [4] 下一页

推荐专题

↑返回顶部打印本页关闭窗口↓

　本站申明

　联系我们

Optimized to 1024x768 to Firefox,Opera and MS-IE6