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酶标记方法介绍

点击： 作者： 来源： 时间： 2007-04-09 　本站论坛

(FDNB)无水乙醇溶液,在室温中混合后，再加入1ml 0.04Mol/L~0.08Mol/L过碘酸钠(NaIO₄)，置室温中轻搅30min，在溶液呈黄绿色时，加1ml 0.16Mol/L乙二醇溶液，在室温中放置1h，使氧化反应中止，然后在4℃中对0.10Mol/L pH 9.5重碳酸钠缓冲液透析，换液3次。在3ml HRP－醛基溶液中，加入5mg(溶于1ml的碳酸盐缓冲液中)，室温置2h~3h，加入5mg氢化硼钠(NaBH₄)，于4℃冰箱放置3h或过夜，然后用PBS液充分透析，离心去沉淀物。上清液即为酶结合物，纯化后使用。

（2）改良过碘酸钠法：①取5mg HRP

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