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酶标记方法介绍

点击： 作者： 来源： 时间： 2007-04-09 　本站论坛

(Dimaleimide)能与蛋白质半胱氨酸的硫基反应。首先用α－巯基乙胺还原蛋白质(IgG),并用N、N^‘－Ｏ－苯二马来酰亚胺活化，然后除去多余的试剂，最后使含二马来酰IgG与含硫基的β－半乳糖苷酶连接。具体操作如下：将抗lgG抗体溶于0.1Mol/L pH5.0醋酸钠缓冲液并对同一缓冲液透析平衡过夜,离心除去不溶性物质,抗IgG(14mg/2ml)与10mlα－巯基乙胺在37℃温育90min。过Sephadex后浓缩使每ml含3.0mg左右的还原抗IgG。在0℃中,按1︰1滴加饱和

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