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表注：表中0～100均为溶血的百分比 表6-7是一份强阳性血清测定结果的一个示例。按比例，抗原1︰100稀释液与强阳性血清的各稀释度所发生的抑制溶血现象最强。如果对弱阳性血清的各稀释液的反应亦与此相同，则此批抗原的效价为1︰100，这就是一个抗原工作量。应注意，测定抗原必须用病马阳性血清，不可使用注射鼻疽死菌免疫的兔高免血清。 5．待检血清和对照血清 对照用鼻疽阳、阴性血清可于兽医生物制品厂购买，也可自送检血清中选取。 待检血清采血时，最好在早饲前或在停食后6h，以免血清混浊。采血后，趁血未凝固，将试管斜置，使其凝成斜面。凝固后将试管置于温暖处，使血清析出，经过10余小时，将血清倾入另一干净无菌试管中。如血清析出不良时，可用镍线将血凝块划破，并使之从管壁脱离，放于冷暗处，使血清充分析出。 血清采后最好于1天内送到实验室，最迟不超过3天。若3天内不能送到，应加防腐剂。通常加0.50％石炭酸防腐。试验前，用生理盐水将待检血清稀释10倍，然后在水浴槽内加温灭能30min，马血清加温到60℃。驴、骡血清为63℃～64℃。灭能不但能消除血清中的补体和抗补体作用，且能使它在反应中作用趋于稳定。 （二）本试验 预备试验完毕之后，即可进行本实验（参见表6-8）。 待检血清作1︰10稀释，分装两管，各0.50ml。其中一管加抗原，一管不加抗原，作为血清抗补体对照。对照血清用阳、阴性血清各一份。补体加一个单位0.50ml。混合后，置37℃水浴中20min。取出后，所有试管加致敏血球1.00ml，混匀、再于37℃水浴中放20min。取出后，判定结果。 表6-8鼻疽补体结合反应本试验操作程序 符号记载说明： ＋＋＋＋ ： 90％～100％抑制溶血。 ＋＋＋ ： 50％～90％抑制溶血。 ＋＋ ： 30％～50％抑制溶血。 ＋ ：10％～30％抑制溶血。 － ：0～10％抑制溶血。 试验结果：阳性血清对照管必须100％抑制溶血，方认为正确。观察反应可使试验结束后进行第一次判定，先将阴性血清判定完。其余血清，可放暗处数小时，待红细胞下沉后，再作第二次判定，较为方便。 在马鼻疽，若反应为“＋＋＋＋”或“＋＋＋”时，可判为阳性；若为“＋＋”或“＋”时判为可疑；若为“－”时判为阴性。 为了判定上的方便，可制出标准溶血管。其制法为：取在本试验中使用的2.50％红细胞混悬液5ml于离心管中，离心沉淀，去上清液，加入20ml蒸馏水，用力振摇，使红细胞完全溶解，再加入5ml 4.50％氯化钠溶液，此为100％溶血液。 上一篇：微量补体结合反应（以钩端螺旋体病为例） 下一篇：免疫酶细胞化学—固定和切片 |
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