| 一、缓冲液
1. 0.01MPBS(PH7.2)液
NaCl 8g
Na2HPO4 1.15g
KH2PO4 0.2g （NaH2PO4）
加双蒸水至 1000ml
2. 0.05MTBS(PH7.4)液
Tris(三羟甲基胺基甲烷) 12.1g
Nacl 17.5g
加双蒸水至 1500ml
在搅拌下加浓HCL至PH7.4，再加双蒸水至2000ml。
3. 0.02MTBS（PH8.2）液
Tris 4.84g
Nacl 17.5g
BSA 2.0g
NaN3 1.0g
加双蒸水至 1500ml
在搅拌下加浓HCL至PH8.2，再加双蒸水至2000ml。
（BSA—牛血清白蛋白；NaN3—叠氮钠，为防腐剂）。
4. 0.05MTB液（PH7.6）
先配制0.05MTB液：
Tris 60.75g
1N HCL 约420ml
双蒸水 至1000ml
配制方法：先以少量双蒸水（300ml）溶解Tris，加入HCL后，再用1N HCL或1N NaOH将PH值调至7.6，再加双蒸水至1000ml。
用时将0.5MTB稀释10倍，即为0.05MTB液（PH7.6）液。
5. 0.05M醋酸缓冲液（PH3.5）
先配制0.1M的醋酸和醋酸钠溶液
0.1M醋酸液：
冰醋酸 5.75ml
双蒸水 加至1000ml
0.1M醋酸钠液：
醋酸钠 13.61g
双蒸水 1000ml
再配制0.1M醋酸缓冲液：
混合即可
0.1M醋酸 210ml
0.1M醋酸钠 790ml
用时将0.1M的醋酸缓冲液稀释5倍，即为0.05M醋酸缓冲液（PH5.2）。
6. 枸橼酸缓冲液
（1）PH3.5
枸橼酸 2.55g
枸橼酸钠 2.35g
双蒸水 加至100ml
（2）PH6.0
21.01g枸橼酸加入蒸馏水1000ml 0.1M枸橼酸
29.41g枸橼酸钠加入蒸馏水1000ml 0.1M枸橼酸钠
使用时取0.1M枸橼酸9ml和0.1M枸橼酸钠41ml，再加入蒸馏水450ml，即配成0.01M的枸橼酸缓冲液（PH6.0±0.1）。用于微波修复抗原时。
二、显色液
1. DAB (Diaminobenzidine) 显色液
DAB（3.3—二氨基联苯胺四盐酸盐） 50mg
0.05MTB(或0.01MPBS) 100ml
30%H2O2 30~40μl
配制方法：先以少量0.05MTB（或0.01MPBS）溶解DAB，充分溶解后加入剩余的TB或PBS，摇匀后（避光）过滤，显色前加入30% H2O2，宁少勿多，便于掌握反应过程。阳性为棕黄色颗粒。
DAB有致癌作用，操作时应格外小心，避免直接与皮肤接触，用后的器皿应充分冲洗，用后的DAB液不应冲入下水道，应集中深埋或清洁液处理后弃之。
2. AEC（3-amino-9-ethylcarbozloe）显色液
AEC（3-氨基- 9-乙基卡巴唑） 20 mg
二甲酰胺（DMF） 2.5 ml
0.05M醋酸缓冲液（PH5.5） 50 ml
30% H2O2 25μl
配制方法：先将AEC溶于DMF中，再加入醋酸缓冲液充分混匀。临显色前加入30% H2O2液。镜下控制显色时间。阳性为深红色颗粒。
3. 4-氯-1萘酚（4-CL-1-NapHthol）显色液
4-氯-1萘酚 100 mg
无水乙醇 10 ml
0.05MTB（PH7.6） 190ml
30% H2O2 10μl
配制方法：先将4-氯-1萘酚溶于无水乙醇中，然后再加入TB190ml，用前加入30%H2O2，显色时间5~20分钟。阳性结果为蓝或深蓝色。
4. α-萘酚显色液（1）
α-萘酚AS-BI磷酸盐 1mg
坚固红TR盐 2mg
底物缓冲液 2ml
二甲基甲酰胺（DMF） 40μl
配制方法：先将α-萘酚AS-BI磷酸盐溶于40μl DMF中，再加入底物缓冲液2l，临用前10分钟加坚固红TR盐。
底物缓冲液（PH8.2~8.3）
0.2M Tris 50ml
0.1M HCL 40ml
Mg2CL·6 H2O 20.3mg
左旋咪唑 20.4mg
双蒸水 加至 100ml
结果为玫瑰红色，若在底物显色液中用坚固兰BB盐代替坚固红TR盐，终产物为深蓝色。
5. α-萘酚显色液（2）
α-萘酚AS-BI磷酸盐 5mg
DMF 0.05ml
丙二醇缓冲液（0.05M，PH9.8） 5ml
坚牢蓝 BB 2mg
配制方法：先将α-萘酚溶于DMF中，然后加入丙二醇缓冲液，临用前加入坚牢蓝BB，溶解过滤后使用。
丙二醇缓冲液（储备液）
2mol/L：
2-氨基-2-甲基-1.3丙二醇 35.64g
6mol/L HCL 32ml
0.005M MgCL2 4ml
左旋咪唑 480mg
双蒸水 加至 200ml
用HCL或NaOH调PH至9.8。
取上述储备液1ml用双蒸水稀释至40ml备用。
阳性结果为蓝色颗粒。
6. α-萘酚显色液（3）
α-萘酚 15mg
DMF 0.5ml
坚固蓝BB盐 30mg
0.05M Tris-HCL(PH9.1) 50ml
左旋咪唑 12mg
配制方法：先将α-萘酚溶于DMF中，加入坚固蓝，再加入Tris-HCL缓冲液，最后加入左旋咪唑，完全溶解过滤后立即使用。显色为37oC，15~30分钟，用0.1%中性红复染30秒~1分钟自来水冲洗，丙酮分化5秒钟，流水冲洗。
阳性结果为蓝色，细胞核为红色或紫色。
银显色液
⑴ 硝酸银显色液
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