| 促甲状腺激素标记免疫分析技术检测方法的研究进展 | | 点击： 作者： 来源： 时间： 2007-04-09 本站论坛 |
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2.2 TSH的第3代检测技术
TSH免疫化学发光测定技术(Immunochemiluminometric assay, ICMA)作为第3代TSH测定方法，是将发光物质标记在抗原或抗体上或作为酶催化底物，通过抗原抗体反应或酶促反应诱导发光，进行测量发光强度的免疫分析方法。ICMA以标记方法的不同而分为两种，即化学发光标记免疫分析法和酶标记、以化学发光底物作信号试剂的化学发光酶免疫分析法。前者是用化学发光剂直接标记TSH抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质为吖啶酯类化合物(Acridinium Ester, AE)。化学发光酶免疫分析(Chemiluminescent Enzyme Immunoassay, CLEIA)，以酶标记TSH抗原或抗体，进行免疫反应，免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物，用发光信号测定仪进行发光测定。
免疫电化学发光分析 (Immunoelectrochemiluminometric assay , IECMA)的反应是在电极表面进行的。发光底物为三联吡啶钌(Ru (byp)32 )，反应参与物三丙胺（TPA）在电极表面失去电子而被氧化，氧化的三丙胺失去一个H 而成为强还原剂，将氧化型的三价钌还原为激发态的二价钌，随即释放光子而恢复为基态的发光底物，这一过程在电极的表面周而复始地进行，产生高效、稳定的持续发光，从而保持底物浓度的恒定。
时间分辨免疫荧光测定技术(Time Resolved Immunofluorometric assay, TRIFMA)是八十年代初问世的一项新型的超微量免疫分析技术。荧光的时间分辨技术是利用荧光发射体的荧光寿命差别，将其荧光分开的荧光光谱技术。以镧系元素为示踪剂代替放射性同位素，用具有双功能基团的镧系元素来标记抗原或抗体，当解离下来的镧系元素与特制的扩增液形成新的螯合物时，其荧光明显增强而持久。用延迟测量的办法可消除样品自身的本底荧光，从而大大提高检测灵敏度。
目前，通过对ICMA 的改进，实现了微磁颗粒子标记，建立了功能灵敏度为0.001mIU/L的第4代TSH测定方法。它的测定范围为0.001-0.5mIU/L，主要对TSH在0.001-0.01mIU/L的标本进行再测定，是第3代TSH测定技术的有效补充。
3. 结束语
第3代TSH免疫分析技术具有灵敏度高、自动化程度高、所需时间短、无放射性污染等特点，现已从实验室研究进入常规临床诊断应用，并形成一定的市场规模，包括拜耳、雅培、罗氏、PE等公司已有多种自动分析仪器的面市，国内一些科研单位也已自行研制开发了一些简单的化学发光和荧光免疫检测仪器。此外，TSH参考物质的建立，使TSH检测方法的评价将更加科学和统一，检测技术也将会不断地改进和发展，为临床提供更准确可靠的数据。与之呼应，检测市场需要大量与之配套的检测试剂体系。考虑到目前化学发光和时间分辨荧光分析仪器几乎全部为国外厂商生产，而绝大多数厂商采用仪器加试剂盒捆绑销售的垄断模式，并在仪器中人为设置排它性检测程序，从而抬高了配套试剂盒价格，增加了检测成本。开发国产低价、稳定、通用的人血TSH ICMA和TRIFMA试剂盒不仅具有较高的科学意义和学术价值，同时也具有广阔的市场应用前景。
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