(9)检测 用酶标测定仪检测波长450 nm处的光密度值(OD450)。
5.计算 测得样品的OD值或结合率(占0管OD值的百分比)，可从标准曲线上直接查到相的孕酮含量。
[注意事项]
1. 用于包被的抗血清浓浓度必须合适，过高就不存在结合的竞争性。
2.奶样中含有对测定的干扰物，因此标准品用脱激素奶样稀释，可以校正非特异性。
3.免疫反应温度不能超过40℃，不利于抗原抗体结合物的生成，且易使酶和抗血清的活性降低。一般37℃温育3 h，38℃温育2.5 h。
4.所用微量加样器，要求吸样准确，应进行检查校正。
[实验结果] 绘制标准曲线图，并报告样品测定结果。
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