| ELISA测定技术的发展和质量控制 | | 点击： 作者： 来源： 时间： 2007-04-08 本站论坛 |
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1.90 |
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在第六次测定后，按上5计算：
n=5 测得S /CO 值为2.10
1.71 1.81 1.81 1.90 2.10
求出x=1.87,s=0.15
计算：
当测定达到21次时，因舍去一个数据（第5个），n=20,排序如下： 1.35 1.43 1.43 1.43 1.52 1.52 1.62 1.71 1.71 1.81 1.81 1.81 1.90 1.90 1.90 2.00 2.00 2.10 2.10 2.14 X=1.76,s=0.25 7.1孔间差变异的控制 ELISA检验孔与孔间的差异的调查，可以在同一块板上获取同一份质控血清至少十孔并行试验的S/CO值的均值Ｘ和标准差Ｓ． 质控血清HBsAg 1 ng/ml作孔间变异Ａ值检测，结果如下： 0.125 0.103 0.103 0.098 0.092 0.099 0.098 0.106 0.098 0.092 Ｘ=1.101 S=0.01 CV=9.3% 通过孔间的变异调查，可以了解不同试剂，不同批号，不同操作者的变异，以便于选择，改进， 了解孔间变异，就可以了解每个样品测定值的可能变动范围，对于制定处于ＣＯ值上下的样品的结果是十分有用的． 2.2批内变异（板间差异）与批间变异的控制 实验室一天需用数块微孔板，这里就存在同一天检测数块板之间的变异（批内变异）和不同天检测之间的变异（批间 变异）的问题。如表： 某实验室内质控数据表 取表2.7中连续20天的每天最大值（x 大）和最小值（x 小）列表，并计算其值差（x 差），求20天值差的均值和标准差，此为批内变异（以x 内、s 内表示）；取每天数值的均值x，求20天均值的均值和标准差，此为批间变异（以x 间、s 间）表示，见表2.8 表2.8 某实验室室内质控批内、批间 数值表（S/CO值）
通过表2.8，计算值差项得出：X内=4.11，S内=2.52
计算均值项得出X间=4.52，S间=1.83
表2.8，X内（4.11），S内（2.52）为批内变异， X间（4.52），S间（1.83）为批间变异。
从该数据反映该室批内变异S内（2.52）大于批间变异S间（1.83）。
一般认为批间变异>批内，而事实往往不一定。因必须重视精密度检测水平。
利用表2.8中的X内和S内做批内变异质控框架图将X大和X小描纪上，并连成线段，观察批内变异十分直观。
利用表2.8中X间和S间做室内批间变异控框架图，并将第21次以后的x值依次描记上。在这里，仅利用表2.8中的均值数据x进行范例描记。见图2.5。
从图2.4中可以看到，线段长短不等。线段越长，反映精密度越差；线段长的越多，反映这一阶段精密度总体情况不好。线段上上下下不平衡地分布在X轴线的上下两侧，反映出批内变异的偏离也很差。
从图2.5中可以看到，前7次数值偏于X轴的下方及第21次到29次，数值呈明显上升趋势，反映出这一段检测处于系统误差之中，应查找原因。
7.3 个体操作变异的控制
当每天检测质控数据按操作者分类计算时，获取每个操作者的日间变异，在日间变异质控图中，描出本室质控曲线变化的同时，用不同颜色，描记出每个操作者质控数值。以了解每个操作者质控结果的变异趋势，用以加强对每个操作者的质控。具体做法，在此不再举例做图了。
图2.5 某实验室批间变异质控图
8.室内质控图的建立及判断
8.1Levey-Jennings质控图
美国W.A.Shewhart于1924年首先提出质量控制图的统计质控方法，自从Shewhart质控图在工业企业中运用以来，用数理统计的方法监测产品质量的不合格成为可行。使产品的不合格率下降，质量控制成为现实。
1949年美国CAP(The College of American Pathologists)。首先开展室间质评(EQA)，从EQA调查中发现许多问题，引起对实验室室内质控的重视。
1950年美国学者Levey和Jenning发表第一篇关于医学检验室内质控方法学研究的论文，将Shewhart质控图介绍给临床化学检验室内质控工作中。
目前，临床免疫学检验也是采用这种质控图进行室内质控。
8.2 Levey-Jennings质控图做法 以20次质控物的检测结果，计算平均值[X]和标准差(s)，定出控制限。 一般以x±2s为警告限，以x-±3s为失控限，做质控框架图。每次(或每天)随病人样本测定的质控物值，标记在质控图上。分析质控图中每天检测质控的结果分布，判断当天检测的样本是否在控制限之列。若当天质控物检测结果失控，则当天病人样本的测定结果报告不能发出。 当以3s为失控限时，每100次约有一次判为失控(99%的合格率)。显然，这个标准太低，使许多失控状态判为合格。当以2s为失控限时，每20次约有一次失控(95%的合格率)，这个标准可以接受。当我们以1.5s为失控限时，就将2/10的结果设定为失控(即约80%的合格率)，显然提高了质控的难度，使操作者需更用心操作，否则易处失控状态。我们建议采用1.5s为失控限。 各实验室选择失控限时，应根据本室条件给予规定。失控限定得太宽(例如定到3s)，几乎不必担心有失控可能，这样常将失控结果误判为合格，使质控失去意义；相反，失控限定得太严(例如定1s为失控限)，使太多的结果，甚至合格的结果，判为失控，这也使质控失去意义。依据本室条件，设定失控限，是室内质控重要的环节。 目前，卫生部临检中心提供某些项目室内质控的全国平均变异系数(cv)，各室可以计算出本室质控s的参考值，直接引入质控图中。 8.3 Westgrad多规则控制方法 (以下简称多规则) (1)多规则的构思： 前述x±3S和x±2S的控制方法二者在误差出灵敏度和对失控误差识别特异性上有着明显的差，Westgard将它们巧妙地结合起来，并且引进其它控制规则，成了多规则控制方法。目的是提高控制效率，既对误差检出具较好的灵敏度，又对失控误差的识别具较好的特异性。 上一篇：用ELISA法检测幽门螺杆菌抗体 下一篇：ELISA（双抗体夹心法）—检测HBsAg
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