一、单糖发酵试验 (一)、实验原理 单糖发酵是将葡萄糖,乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内,使其最终浓度为0.75~1%。并加入一定量酚红指示剂及小倒管,制成单糖发酵管,接种细菌经37℃培养18~24小时,若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄,若能分解甲酸有CO 2
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  • 微生物糖发酵(生化)试验

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-12-27    本站论坛
1/10苛性钠(NaOH) 8ml
蒸馏水 92ml
将酚红入研钵徐徐加入苛性钠研磨,再补足蒸馏水即成。若需长时间保存,可高压灭菌后贮存备用。
6.葡萄糖蛋白胨水培养物
成分:蛋白胨5g   葡萄糖5g
制法:
(1)将上述成分溶解于蒸馏水中。
(2)调节pH至7.6,用滤纸过滤除渣。
(3)分装中试管,每管约3-4ml,灭菌后备用。
用途:供甲基红及V-P试验用。
7.枸橼酸盐斜面培养基的制备
成分:磷酸二氢铵0.1g     磷酸氢二钾0.1g
硫酸镁0.02g        枸橼酸钠0.23g
氯化钠0.5g         琼脂2g
蒸馏水100ml    0.5%溴麝香草酚蓝酒精溶液2ml
制法:
(1)先将上述各种盐类溶解于蒸馏水中,使其完全溶解。
(2)矫正pH至6.8,然后加入琼脂和指标剂。
(3)摇匀,脱脂棉过滤,分装中试管,每管约3-5ml。
(4)灭菌后置成斜面备用(冷后为绿色)
  用途:供枸橼酸盐利用试验用。
8.醋酸铅培养基的制备
成分:2%肉汤琼脂200ml   硫代硫酸钠0.05g
醋酸铅10g          蒸馏水100ml
制法:
(1)先将10g醋酸铅加入100ml蒸馏水中融化,间歇灭菌或低压菌后备用(10%醋酸铅溶液)。
(2)加热溶化2%肉汤琼脂200ml,加入硫代硫酸钠0.05g,混合后高压灭菌。
(3)从高压灭菌锅取出,待冷却至45℃左右时。无菌操作加入无菌的10%醋酸铅溶液1毫升,摇匀。
(4)分装小试管,每管约2ml,直立待冷凝后备用。
用途:供硫代氢生成试验用。
说明:醋酸铅与硫代硫酸钠不宜久然。
9.尿素培养基的制备
 成分: 蛋白胨1g     氯化钠5g
葡萄糖1g     蒸馏水900ml
琼脂15~20g   0.1%酚红   12ml
20%尿素水溶液(无菌)100ml  
制法:(1)除尿素、琼脂和酚红外,其余成分溶于水中,加热溶化,矫正pH至6.8~6.9。
(2)加入琼脂和酚红,8~10磅10分钟灭菌。
(3)冷却至60℃后加入无菌尿素溶液,摇匀。
(4)分装中试管(无菌),每管3~4ml,置成斜面备用。
用途:供尿素分解试验用。
说明:(1)尿素不耐热,也不能久存,只能用滤器除菌。
(2)无菌尿素溶液制备:称取尿素20g,混合于100ml蒸馏水中,充分摇匀,用G6滤菌器过滤除菌,以达到无菌的目的。
10.巧克力色琼脂平板的制备
成分:肉汤琼脂100ml  无菌脱纤维羊或兔血10ml。
制法:
(1)将肉汤琼脂加热溶化,趁热加入脱纤维血,摇匀。
(2)倾注平板,待冷却成巧克力色,备用。
用途:用于培养脑膜炎双球菌或淋球菌。
说明:加血一定要趁热加。

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