114.一般真菌培养多选用何种培养基?列出其主要成分及pH,培养基内应添加何种抗生素有利于真菌检出?
答：一般真菌培养多选用沙保弱琼脂,主要成分有蛋白胨、葡萄糖、琼脂等,其pH4.0-6.0,其中添加氯霉素和放线菌酮等抗生素,可抑制细菌和许多霉菌生长,有利于皮肤癣菌的检测;仅添加氯霉素、四环素、庆大霉素等可抑制细菌生长,有利于深部真菌检测。
115.念珠菌属可引起人类哪些疾病?
答：念珠菌属可引起浅部和全身性感染,浅部念珠菌病包括鹅口疮、阴道炎、角膜炎、甲沟炎等;局部念珠病有口腔念珠菌病、食管念珠菌病,全身性感染依其侵犯部位及病人状态表现不同症状,有支气管和肺念珠菌病、念珠菌性肠炎、念珠菌性膀胱炎或肾盂肾炎,还有念珠菌心内膜炎及全身性念珠菌病等。
116.隐球菌属中哪种菌为人类病原菌?可引起人类哪些疾病?
答：隐球菌属中仅新型隐球菌为人类病原菌,本菌经呼吸道侵入人体,由血流播散至脑及脑膜,也可侵犯皮肤、骨和关节,在播散性感染中,常可由病人尿中培养出新型隐球菌。隐球菌病,特别是隐球菌性脑膜炎,常在系统性红斑狼疮、类肉瘤、白血病、淋巴瘤、艾滋病及柯兴氏(cushing)综合征病人中发生。有报道45%艾滋病病人有隐球菌条件性感染。
117.曲霉菌可引起人类哪些疾病?请列举三种常见的致病性曲霉菌。
答：曲霉病可以引起原发性感染,也可致继发性感染,出现过敏性反应、浅部感染、肺曲霉菌病,侵袭性(播散性)曲霉菌病。烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉为常见的致病性曲霉菌。
118.皮肤真菌主要侵犯人类哪些组织?可引起哪些皮肤癣菌病?
答：皮肤真菌主要侵犯人类皮肤、毛发和指(趾)甲,引起皮肤真菌病,又称癣病,可引起头癣、黄癣、须癣、体癣、叠瓦癣、股癣、足癣、手癣、甲癣等皮肤癣菌病。
119.如何用直接镜检法检测皮肤真菌?
答：皮肤采样先用70%-75%酒精消毒,取新发生的皮肤损害边缘皮屑;指甲近尖端下面或背部外表用刀刮去,再采用甲屑培养;头发标本用消毒慑子拔取无光泽病发,有些断发要用无菌尖刀掘出。将标本盛于清洁纸袋,鳞屑可用黑纸包好运送。标本用10%KOH/NaOH制成湿片,指甲可用强碱如25%KOH/NaOH,或25% KOH含5%甘油处理,然后镜检。
120.在微生物实验室中,暗视野显微镜多用于什么检查?
答：暗视野显微镜多用于观察不易染色微生物的形态和动力观察,如螺旋体形态和霍乱弧菌的流星样运动等。
121.简述相差显微镜的使用原理及其在微生物学检验中的用途。
答：相差显微镜的使用原理:当光线透过标本时,由于标本不同部位的密度不同,引起光位相的差异。相差板的光栅作用改变直射光的光位相和振幅,把光位相差异转化为光强度的差异,从而显示出细菌结构不同部位的差异。
用途:多用于观察微生物的形态、内部结构、运动方式及繁殖过程。
122.简述抗酸染色原理及染色步骤。
答：抗酸染色原理:分枝杆菌细胞壁含脂质较多,其中主要成分为分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性乙醇的脱色作用,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到染色目的。
步骤:萋纳石炭酸复红染色,加温促使菌体着色;3%盐酸乙醇脱色;吕氏美蓝复染,未脱色细菌呈红色为抗酸性细菌,脱色经复染呈蓝色的细菌为非抗酸性细菌。
123.根据其用途、物理性状可将培养基分为哪几类?
答：培养基根据用途可分为:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基、特殊培养基。
根据物理性状培养基可分为:液体、固体和半固体三大类。
124.简述用于分离嗜血杆菌的巧克力琼脂制作要点。
答：营养丰富的基础培养基(如进口胰消化大豆粉琼脂、哥伦比亚琼脂、新鲜配制的牛肉浸液等),115℃15min高压蒸气灭菌,冷却至80℃加入5%-10%动物血(马血最佳,兔血亦可,羊血次之),维持80℃,不断旋摇10-15min,冷至50℃加入万古霉素至最终浓度为50μg/ml倾注平皿,厚度为4mm,以上制备要求可获得高质量的巧克力琼脂培养基。
125.细菌接种方法有哪儿种?
答：平板划线法、斜面接种法、倾注平板法、穿刺接种法和液体接种法,其中平板划线法又分为分区划线法和连续划线法。
126.干热灭菌法与湿热灭菌法哪种灭菌效果较好?为什么?
答：在同一温度下,湿热的灭菌效果大于干热,原因为:
(1)湿热供给充足的水分,蛋白质在含水多的环境中易凝固,随着蛋白质含水量的增加,凝固所需温度降低。
(2)水是热的良导体,湿热传导快,穿透性强,可使被灭菌物品内温度迅速上升,而干热靠辐射传导,穿透性差。
(3)湿热的蒸气可放出潜热,这种潜热可迅速升高物品的温度。
127.细菌检验分级报告制度有哪些限时性?
答：分级报告制度有限时性,如涂片限2h内报告,初步培养鉴定和直接药敏结果限24h或次晨报告,最后鉴定和细菌药敏结果一般不超过3d,还规定除血培养外,所有送检标本24h内必须有预报。
128.细菌生长繁殖的基本条件有哪些?
答：细菌生长繁殖的基本条件:
(1)营养物质:充足的营养是细菌进行新陈代谢的物质基础,包括水分、碳源、氮源和维生素、无机盐类,除此之外,营养要求较高的细菌还需添加另外的物质和某些生长因子。
(2)氢离子浓度(pH)、温度及气体也是细菌生长繁殖的基本条件。pH随菌种的不同有较大的差异,但一般均要求pH7.2-7.4,温度一般要求在35℃-37℃,有的细菌可在室温下(22℃)生长。与细菌生长有关的气体有氧和二氧化碳。
129.试简述支原体的培养特性。
答：支原体的培养特性为:1营养要求较高,培养基中需加入动物血清及酵母浸液等添加剂;2大多数支原体最适pH7.6-8.0(除解脲脲原体外),最适温度为37℃,在微氧环境中生长最佳;3生长缓慢,在液体培养基中呈烟雾状生长;在固体培养基中最大的菌落肉眼可分辨,呈现出油煎蛋样外观。
130.二性霉素B破坏支原体的机制是什么?
答：二性霉素B可与支原体细胞膜中固醇类物质相结合,改变膜的通透性,胞浆内容物逸出而致细胞死亡。支原体的细胞膜有三层,内外两层为蛋白质,中间层为脂质,其中固醇类物质含量较高。故凡能作用于固醇类的物质如二性霉素B等均可破坏其细胞膜使其死亡。
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