82.简述病毒复制的基本过程。
答:病毒复制的基本过程为:1吸附,即病毒颗粒与细胞膜的受体发生相互作用后病毒颗粒特异性地吸附于宿主细胞表面;2穿入,病毒吸附于宿主细胞膜后以各种不同的方式进入细胞,此即穿入;3脱壳,病毒在宿主细胞内脱去核壳,病毒核酸随后进入细胞的一定部位;4病毒大分子的生物合成,病毒基因组进入宿主细胞后,一方面表达与合成病毒复制过程中所必需的结构蛋白和非结构蛋白,另一方面进行复制合成子代病毒核酸;5装配与释放,病毒核酸与壳体蛋白合成完毕后,在细胞核内或胞浆内装配成熟为病毒颗粒(核衣壳),此即子代病毒体,然后子代病毒体以不同方式从感染细胞中释放到细胞外环境。
83.简述病毒鉴定的基本原则。
答:鉴定病毒的基本原则包括:根据病毒的生物学特性如病毒的形态、大小与结构等加以鉴定;根据病毒的宿主范围及受染宿主的症状加以鉴定;根据病毒的理化性质如核酸的类型及其对理化因素的抵抗能力等加以鉴定:根据病毒的血清学反应加以鉴定。
84.简述病毒分类的基本原则。
答:分类的基本原则包括:1核酸的类型、结构和分子量等;2病毒体的形态、大小与基本结构;3病毒体对乙醚、氯仿等脂溶剂的敏感性;4血清学性质与抗原关系;5病毒在细胞培养上的繁殖特征;6对除脂溶剂以外的其他理化因子的敏感性;7流行病学特征。
85.什么是细胞病变效应,它在病毒鉴定中有何意义?
答:细胞病变效应(CPE)是指病毒在宿主细胞中复制后导致细胞内发生一系列变化,如:开始时,细胞核发生变化,染色质着边,核浓缩,随后细胞膜发生变化,失去黏附作用,细胞变圆,从培养瓶壁脱落,或细胞互相融合等。这些变化可通过显微镜检查。各种病毒产生CPE各不相同,各有其特点,故可借以初步鉴定病毒种属,并可作为病毒增殖的指标。
86.鉴定病毒时常用的血清学反应有哪几种?
答:鉴定病毒时常用的血清学反应有:中和试验、血凝抑制试验、酶联免疫试验、放射免疫试验、免疫荧光技术、补体结合试验、胶乳凝集试验、免疫电镜技术等。
87.什么是温度敏感突变株?有何用途?
答:温度敏感突变株(ts株)为病毒的一种突变形式。其特点是病毒突变后在较低温度下能够繁殖,但在较高温度下不能够繁殖。ts突变株常为减毒株,用于病毒遗传学研究及制备疫苗。
88.纯化病毒过程中应注意哪些问题?
答:纯化病毒过程中应注意:1保持病毒的感染性,如严格控制温度,pH等;2选择适宜的纯化材料,如无其他病毒污染,含病毒量较多,杂质少并易于处理;3选择合适的提纯方法;4建立灵敏的病毒测定和鉴定方法。
89.简述病毒的遗传物质变异的主要机理。
答:病毒发生变异的主要机理有:1病毒基因突变,即病毒基因组因自发的或经诱导后其基因核苷酸顺序发生改变,主要有点突变和缺失突变;2病毒基因重组,即来自两个或多个病毒颗粒的遗传物质重配于子代重组体病毒中,病毒重组体含有来自两个或多个不同病毒基因组的核酸序列,出现与亲代病毒不同的基因型和表型。主要有两种方式:分子内重组和基因重配。
90.简述持续性感染发生的机制及分类?各举一例说明。
答:导致持续性感染发生的机制有:1病毒因素,如病毒基因组与细胞染色体整合、病毒无免疫原性或较弱、病毒致细胞病变效应较弱、病毒发生变异和病毒感染后产生干扰缺损病毒;2宿主因素,如病毒在机体受保护部位生长、机体产生非中和抗体和机体产生免疫耐受及细胞免疫缺陷等。 持续性感染分为:1潜伏性感染:病毒在初次感染后,以某种形式在细胞内长期潜伏下来,既不繁殖,也不致病,且潜伏期内检不出病毒,但在某些条件下可被激活,病毒开始繁殖并致病,如HSV、EBV、CMV等;2慢性感染:某些病毒在急性感染后,可转入慢性持续性感染,机体能很长时间或终身不断地产生有感染性的病毒颗粒,如HBV;3慢病毒感染:病毒进入机体后,短期内不产生任何症状,经过长期潜伏后,病毒表现出致病性,这类感染发病缓慢,逐渐发展终致机体死亡。如麻彦病毒引起的亚急性硬化性全脑炎。
91.简述干扰素的抗病毒机理。
答:干扰素作用于敏感细胞后使之产生抗病毒蛋白从而阻止病毒的复制与合成。干扰素分三种:α-干扰素,主要由白细胞产生;β-干扰素,由成纤维母细胞产生;γ-干扰素,由淋巴细胞产生。干扰素的抗病毒机理为:干扰素作用于敏感细胞后产生抗病毒蛋白(AVP),抗病毒蛋白(AVP)主要有两种:一种为蛋白激酶,它可以阻断病毒蛋白质的合成;另一种为2’-5’A合成酶,它可以降解病毒mRNA。干扰素主要通过抗病毒蛋白发挥抗病毒作用。
92.如何采集和保存病毒标本?
答:采集样本时间最好在发病初期或者入院当天;标本应收集于无菌容器中;标本一般应从感染的部位采取。对于分离培养病毒的标本要快速送到实验室,并立即处理和接种。对于需较长时间冻存的标本,最好置于-70℃。
93.试介绍几种病毒分离培养方法?
答:组织培养和鸡胚接种,动物接种。其中组织培养又包括器官培养,组织块培养、单层细胞培养。单层细胞培养又分为原代、次代细胞培养、二倍体细胞株和传代细胞系培养。
94.简述流感病毒的形态与结构。
答:流感病毒颗粒具有多形性,一般呈粗糙球形,直径为80-120nm,有时呈丝状体,在新分离的毒株中多见。流感病毒的结构由内向外依次分为核心、基质蛋白(M蛋白)和包膜三个部分。
95.流感病毒的快速诊断方法有哪几种?
答:(1)免疫方法检测标本中抗原如IFA、EIA及放射免疫技术均可检测培养物及标本中的抗原。 (2)分子杂交检测病毒RNA。 (3)RT-PCR检测培养物及标本中流感病毒RNA,并能进行病毒分型及分亚型。 (4)免疫电镜技术。 96.人类肠道病毒的主要种类及共同的生物学性状是什么?
答:人类肠道病毒主要有脊髓灰质炎病毒,柯萨基病毒A和B组、埃可病毒及新型肠道病毒5个亚属或亚群。其共同生物学性状为:肠道病毒是小病毒,由简单的病毒衣壳和单正股RNA组成。衣壳含4种蛋白质,以60个重复原粒单位排列成20面体。人类肠道病毒的RNA为单一分子,长约7.4kb,该RNA既充当病毒蛋白质翻译的模板,又充当RNA复制的模板。能在猴肾、人胚肾、人羊膜细胞、Hp-2、Hela细胞等细胞进行培养。肠道病毒对酸稳定,耐乙醚,对紫外线、干燥、热均敏感。
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