146.如何区分普氏立克次体与莫氏立克次体?
答：普氏立克次体与莫氏立克次体生物学性状基本相同,它们都可引起斑疹伤寒。可抽取病人血液注入雄性豚鼠腹腔观察阴囊反应。阴囊肿大、睾丸鞘膜渗出性炎症为阴囊反应阳性,此为莫氏立克次体的感染;无红肿反应则为阴囊反应阴性,为普氏立克次体的感染。
147.如何检验钩端螺旋体病?
答：主要有二类方法:一类是检查钩端螺旋体,另一类是血清学试验查钩体的抗体。查钩体的具体方法有1镜检法;2分离培养法;3动物接种法。血清学试验常用的方法有显微镜凝集试验、微量补体结合试验等。
148.检测引起泌尿生殖系感染的支原体有何临床意义?
答：在泌尿生殖道已发现多种支原体,其中人型支原体、解脲脲原体是引起泌尿生殖道感染的重要的病原体。约有30%-40%的非衣原体、非淋菌性尿道炎是由解脲脲原体引起的,它还可以引起睾丸附睾炎、慢性前列腺炎、宫颈炎、阴道炎等,还可导致尿路结石和男性不育。人型支原体在很多细菌性阴道炎的病例中检测率大大高于健康女性,但仅当检测到分泌物中人型支原体≥105时,才提示可能有临床意义即可能与非细菌性阴道炎有关。
149.简述不同支原体对小分子营养物质的利用情况。
答：大多数支原体能利用葡萄糖或精氨酸作为能源,如肺炎支原体和生殖道支原体能发酵葡萄糖,产酸不产气。而人型支原体、口腔支原体等有精氨酸脱氢酶,能水解培养基中的精氨酸,释放出氨气。解脲脲原体既不能利用葡萄糖,也不能利用精氨酸,但可利用尿素并释放出氨气。临床检验中,可以利用这些反应所致培养基pH的改变而观察标本中是否有支原体的存在。
150.试述鸡胚卵黄囊培养法对立克次体分离株如何进行繁殖及保存。
答：可选用莱亨鸡的受精鸡蛋,在温度为38℃-39℃、相对湿度为45%-60%下孵育4d后,如为活胚,则在第5-7d元菌操作将立克次体分离株从气室端注入到鸡胚卵黄囊中,置32℃-35℃孵育以繁殖立克次体。凡接种4d后死亡者解剖收获卵黄囊,经涂片染色镜检,选择含立克次体较多而无细菌的卵黄囊膜,将其制备成一定浓度的悬液,置-70℃冰箱或液氮中保存或冰冻干燥保藏。
151.苯丙氨酸、葡萄糖酸盐试验在肠杆菌科细菌鉴定的应用价值。
答：通过苯丙氨酸、葡萄糖酸盐的阴性和阳性结果将肠杆菌科细菌分为三大类,对于细菌鉴定到属有价值。
152.细菌生化试验主要包括那几大类?
答：糖(醇、苷)类代谢试验,氨基酸和蛋白质的代谢试验,碳源和氮源利用试验,呼吸酶类试验,脂酶、磷酸酶和DNA酶和其他酶类试验。
153.简述细菌对糖（醇、苷）分解试验的原理和影响因素。
答：由于细菌各自具有不同的酶系统,对糖(醇)的分解能力不同,有的能分解某些糖产生酸和气体,有的虽能分解糖产生酸,但不生成气体,有的则不分解糖。糖类分解试验的影响因素有:培养基内的糖浓度;糖在高压蒸汽灭菌时水解变质;糖发酵的基础培养基内,必须不含有任何糖类和硝酸盐,以免出现假阳性反应;有些糖类加入培养基后可使培养基变酸,需用0.1N NaOH调整到所需的pH。
154.O/F试验过程中应注意的事项有哪些?
答：有些细菌不能在Hugh-Leifson二氏培养基上生长,应在培养基中加入2%血清或0.1%酵母浸膏,重做0-F实验。氧化反应迟缓或减弱时,在开放管表面可看到碱性反应,常误认为阴性,延长培养时间可恢复到酸性。指示剂不能用酒精溶液,因细菌可使酒精产酸,导致假阳性。
155.简述VP试验实验原理及主要用途。
答：有些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸,再进一步将丙酮酸脱羟变为乙酰甲基甲醇,在碱性环境中被空气中的氧氧化为二乙酰,二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含的胍基发生反应生成红色的化合物。主要用于肠杆菌属细菌的鉴别。沙雷氏菌、阴沟肠杆菌等VP反应阳性,大肠埃希菌、沙门氏菌、志贺氏菌等VP反应阴性。
156.简述甲基红试验实验原理及主要用途。
答：某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步被分解为乳酸、乙酸、甲酸等,而使培养基pH下降,加入甲基红指示剂出现红色。
主要用于大肠埃希菌和产气肠杆菌的鉴别。前者为阳性,后者为阴性。
157.如何快速鉴别迟缓分解乳糖的细菌?
答：使用ONPG试验即β-半乳糖苷酶试验。如细菌只有β-半乳糖苷酶,而缺乏半乳糖苷渗透酶,用ONPG试验可迅速取得阳性结果。
158.简述苯丙氨酸脱氨酶主要鉴别作用及实验结果判断注意事项。
答：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定,变形杆菌属、摩根菌属和普罗菲登菌属均为阳性,其他肠杆菌科细菌为阴性。
加入三氯化铁试剂后必须立即判定结果,因绿色很快褪去。结果必须在5min内作出判定。
159.简述氨基酸脱羟酶试验影响因素及注意事项。
答：应做对照管,如果对照管为阳性,则所有氨基酸的脱羟酶试验皆无效;如培养时间过长,指示剂破坏,颜色不清楚,可在试管中再加入溴甲酚紫来证实。
160.靛基质试验成功的关键是什么?
答：蛋白胨中必须含有色氨酸,否则会出现假阴性;色氨酸酶活性的最适pH为7.4-7.8,pH降低靛基质产生减少,可能出现假阴性或弱阳性反应;Kovac氏试剂(靛基质试剂I)应保存于带玻璃塞的棕色瓶中,放置时间不宜过长,否则其敏感度降低。
161.DNA酶的实验原理及用途是什么?
答：DNA酶可将DNA长链水解成由几个单核苷酸组成的寡核苷酸链,寡核苷酸可溶于酸,故于DNA琼脂平板上加入盐酸,在菌落周围形成透明环。
在肠杆菌科中沙雷菌和变形杆菌可产生DNA酶,阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生DNA酶,故可用此试验做鉴别。
162.试举例说明克氏双糖反应原理及应用。
答：克氏双糖内葡萄糖和乳糖的比例为1:10。如果细菌只分解葡萄糖,不分解乳糖,则斜面上产生少量的酸,且易被氧化产生氨呈弱碱性,故斜面变为红色,底层变酸呈黄色,例如沙门菌。如果细菌分解葡萄糖和乳糖,产生大量的酸,底层和斜面均呈黄色,例如大肠埃希菌。如果细菌既不分解葡萄糖,也不分解乳糖则底层和斜面均不变色,例如铜绿假单胞菌。
163.为什么革兰阴性杆菌都应做氧化酶试验。
答：所有的阴性杆菌均应进行氧化酶试验,否则可能将阳性的嗜水气单胞菌错误地鉴定为大肠埃希菌或沙雷菌,将类志贺邻单胞菌错误地鉴别为宋内志贺菌,同时也会将某些非发酵菌作出错误鉴定。
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