挑取乎板上的可疑菌落,接种在三糖铁琼脂和半固体各一管。一般应多挑几个茵落
以防遗漏。志贺氏茵属在三糖铁琼脂内的反应结果为底层产酸,不产气(福氏志贺氏茵
6型可微产气),斜面产碱,不产生硫化氢;半固体管内沿穿刺线生长,无动力,具有以
上特性的菌株,疑为志贺氏菌,可做血清学凝集试验。
在做血清学试验的同时,应同时做苯丙氨酸脱氨酶、赖氨酸脱羧酶、西蒙氏
柠檬酸盐和葡糖胺、尿素、KCN、水杨苷、七叶苷试验,志贺氏茵属均为阴性反应。必要时应做革兰氏染色检查和氧化酶试验,应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。并用生化试验方法做4个生化群的鉴定。见表5-1
表5-1 志贺氏菌属四个群的生化特性
|
生 化 群 |
5%乳糖 |
甘露醇 |
棉籽糖 |
甘油 |
靛青质 |
|
A群:痢疾志贺氏菌 |
- |
- |
- |
(+) |
-/+ |
|
B群:福氏志贺氏菌 |
- |
+ |
+ |
- |
(+) |
|
C群:鲍氏志贺氏菌 |
- |
+ |
- |
(+) |
-/+ |
|
D群:宋内氏志贺氏菌 |
(+) |
+ |
+ |
d |
- |
注:+阳性;-阴性;-/+多数阴性,少数阳性;(+)迟缓阳性;d有不
5.4 血清学分型
挑取三糖铁琼脂上的培养物,做玻片凝集试验。先用4种志贺氏菌多价血清检查。如果由于K抗原的存在而不出现凝集,应将菌液煮沸后再检查;如果呈现凝集,则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。如系B群福氏志贺氏菌,则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表5-2。可先用群因子血清检查,再根据群因子血清出现凝集的结果,依次选用型因子血清检查(表5-3)。
表5-2 福氏志贺氏菌各型和亚型的型抗原和群抗原
|
型和亚型 |
型抗原 |
群抗原 |
在群因子血清中的凝集 |
|
3,4 |
6 |
7,8 |
|
1a |
I |
1,2,4,5,9…… |
+ |
- |
- |
|
1b |
I |
1,2,4,5,9…… |
+ |
+ |
- |
|
2a |
II |
1,3,4…… |
+ |
- |
- |
|
2b |
II |
1,7,8,9…… |
- |
- |
+ |
|
3a |
III |
1,6,7,8,9…… |
- |
+ |
+ |
|
3b |
III |
1,3,4,6…… |
+ |
+ |
- |
|
4a |
IV |
1,(3,4)…… |
(+) |
- |
- |
|
4b |
IV |
1,3,4,6…… |
+ |
+ |
- |
|
5a |
V |
1,3,4…… |
+ |
- |
- |
|
5b |
V |
1,5,7,9…… |
- |
- |
+ |
|
6 |
VI |
1,2,(4)…… |
(+) |
- |
- |
|
X变体 |
— |
1,7,8,9…… |
- |
- |
+ |
|
Y变体 |
— |
1,3,4…… |
+ |
- |
- |
注:+凝集;-不凝集;()有或无。
6 结果
根据实验过程详细记录样品和对照菌种的各项结果,并做出结论报告。
7 思考
7.1 如何检出食品中的志贺氏菌?
7.2 根据培养和生化试验,有否检出志贺氏菌?7.3 根据生化特性和血清学试验,检出的志贺氏菌属哪个群?哪个型?
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