【实验目的】
利用和培育抗病品种，是防治病害的根本性措施，要搞好抗病育种工作，必须熟练掌握植物抗病性和病原物致病性分化的测定方法，病害的性质不同，其寄主抗病性和病原物生理分化测定的方法也不同。国内外，在水稻对稻瘟病的抗病性方面的研究很多，尤其是生理小种的鉴定工作，许多方法对水稻的研究都是适用的，对其他病害也可借鉴，在理论和实践上颇具代表性，因此选水稻稻瘟病作实验材料，学习植物抗病性鉴定和病原物生理分化测定的基本方法，以便为今后抗病育种工作打下坚实的基础。
【内容、材料和方法】
(一)繁殖菌种
进行抗病性鉴定，需要足够的菌量，故需对采集标本上的锈菌加以活化繁殖，菌量够用后即开始品种抗病性鉴定，繁殖菌种的方法如下：
1.准备感病品种幼菌，盆播高感稻瘟病的品种。
2.接种：在秧苗长出1—2片叶时即可接种，接种常用的方法：
喷雾法：孢子量多时，可在三角瓶中洗下孢子，调成孢子悬浮液，用喉头喷雾器喷洒，配制孢子悬浮液时，先用少量水调成稠糊状，待孢子表面充分湿润后，再逐步加水稀释，以免孢子漂浮在水面上。
为了提高接种效果接种前毛笔加石英砂去掉叶表面的蜡层，以利孢子悬浮液展着和病菌的侵入，方法是用姆指和食指蘸水少许，轻轻捏住叶片，自基部向上摩擦几次即可。
3.保湿：稻瘟病病菌需要在叶面有水滴或水膜的高湿条件下方能萌发侵入，所以接种后必须在保湿框或保湿箱中保湿35—48小时，方法是将小花盆放在保湿框中，罩上塑料布，塑料布外再缠上润湿的棉布，保湿过程中，保持16—22℃的温度，对孢子的萌发侵入是很重要的条件。
4.接种后管理
(1)光照：接过种的秧苗自保湿箱中取出后应放在有日光的地方，冬季在温室中一般还要给以辅助光照，辅助光照多40瓦日光灯或100瓦灯泡，在傍晚和夜间补充照射，对形成孢子或稻瘟病症状的正常反应都很有利，日光灯更好些，因为近照秧苗时，不致于热力伤苗。
(2)温度：稻瘟病病菌的潜育适温是25℃左右。
(3)湿度：在接种后潜育期内，湿度虽不象光照和温度那样重要，但与孢子形成和症状的正常反应也有一定关系，因此，温室中应经常洒水，以提高室内空气湿度。
(4)防止污染：无论生理小种鉴定，还是品种抗瘟性测定，都要注意保持菌种纯度，防止污染，操作时要严格消毒，接种针每挑取一个标样上的孢子后要经灯焰灭菌，凡改换菌种标样都需用70%的酒精擦手消毒。
5.菌种的保存
保存菌种：保存菌种常用以下两种方法
a）干燥保存法：将装有孢子的指形管，用两纱布包住管口，放入干燥器内，再将干燥器放在2—4℃的冰箱内，此法可保存1—3个月。
b）半真空保存法，将孢子装在安培瓶中，瓶中堵以少量的脱脂棉，由抽气机将瓶中气压抽至1mm水银柱，然后将瓶口用火烧封闭，放在2—4℃冰箱中，可保存1年左右。
接种用的菌种，可分别用不同的小种单接也可将几种混合混接。一般先混合接种，进行初步鉴定和筛选，再分别接种作进一步的鉴定，接种保湿方法同前。
(三)生理小种鉴定
1.鉴定步骤
从田间收到一个标本(以下称标样)到确定它属何生理小种，大致经过如下程序：标样采集→菌种培养→孢子洗涤→接种鉴定。
2.鉴定方法
扩繁菌种，接种的具体方法同抗病性鉴定。生理小种鉴定，是观察某一标本在一整套鉴定品种上的反应型，反应型记载标准如下：
调查分级标准：按国际水稻所稻瘟病抗性评价分级标准。
叶瘟：
0级：无病
1级：仅有小的针尖大小的褐点
2级：较大褐点
3级：小而圆以至稍长的褐色的环死灰斑，直径1—2毫米。
4级：典型的稻瘟病斑或椭圆型，长1—2厘米，常限于两条叶脉间，病斑面积不足叶面积的2%。
5级：典型的稻瘟病斑，受害面积小于10%。
6级：典型的稻瘟病斑，受害面积为10—25%
7级：典型的稻瘟病斑，受害面积为26—50%
8级：典型的稻瘟病斑，受害面积为51—75%
9级：全部叶片死亡。
2) 然后查阅检索表，最后确定该标样属何小种。所有标样都鉴定之后，统计某一小种出现的频率。在反应型符号的后面，有时还加一些附加符号，这些符号的意义如下：“+”或“-”指反应型的差异范围，“++”指差异的最高限，“=”指差异最低限，“±”指差异在“+”和“-”之间
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