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简单染色法与革兰氏染色法

点击： 作者： 来源： 时间： 2007-03-06 　本站论坛

用卢戈氏碘液媒染约l min ，水洗。
5.4 脱色
用滤纸吸去玻片上的残水，将玻片倾斜，在白色背景下，用滴管流加95%的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗，终止脱色，将载玻片上水甩净。
革兰氏染色结果是否正确，乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节。脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌，脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌。脱色时间一般约20～30s。
5.5 复染
在涂片上滴加番红液复染约2～3min ，水洗，然后用吸水纸吸干。在染色的过程中，不可使染液干涸。
5.6 镜检
干燥后，用油镜观察。判断两种菌体染色反应性。菌体被染成蓝紫色的是革兰氏阳性菌（G ），被染成红色的为革兰氏阴性菌（G-）。
5.7 实验结束后处理
清洁显微镜。先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少许二甲苯擦去镜头上的残留油迹，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯。染色玻片用洗衣粉水煮沸、清洗，凉干后备用。
6 结果
6.1 根据观察结果，绘出两种细菌的形态图。
6.2列表简述两株细菌的染色结果(说明各菌的形状、颜色和革兰氏染色反应)。
7 思考
7.1 哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？
7.2 进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题?
7.3 革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色?
7.4 不经过复染这一步，能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌？
7.5 你认为制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节?
7.6 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?
7.7 如果涂片未经热固定，将会出现什么问题?加热温度过高、时间太长，又会怎样呢?

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