细菌分布及外界因素对细菌影响的检测
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  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-03-06    本站论坛

2. 溶菌斑 如图5,在②处的中央有一无菌生长的空斑,即溶菌斑(或蚀斑),其余部位无此现象。
八、紫外线的杀菌试验
【原理】
波长240nm~280nm的紫外线,因与DNA吸收光谱一致,而具有明显的杀菌作用。其机制是使细菌DNA链中两个相邻的胸腺嘧啶形成二聚体,从而破坏DNA构型,干扰其正常复制,导致细菌死亡。
【材料】
1. 菌种:大肠杆菌18~24小时琼脂斜面培养物。
2. 培养基:普通琼脂平板。
3. 无菌黑色图案纸片,紫外线灯,消毒液。
【方法】
1. 用接种环取大肠杆菌琼脂斜面培养物,密涂于普通琼脂平板培养基表面。
2.火焰灭菌小镊子、待稍凉后,打开平皿盖,取无菌黑纸片一片平贴于涂有细菌的平板培养基表面中间。
3. 将平板暴露于距紫外灯管20~30cm处,打开紫外线灯照射30分钟。
4. 照射完毕,无菌操作取出黑纸片,投入消毒液中,盖上皿盖,做标记,注明日期,试验者等。
5. 置37℃培养18~24小时,观察培养基表面细菌生长情况、并分析其结果。
【结果】
黑纸片遮盖处细菌生长形成灰白色菌苔,形状同黑纸片形状。直接暴露在紫外线灯下的培养基表面无生长或仅有少量的细菌生长,形成菌落。
【应用】
紫外线的杀菌力虽强,但穿透力弱,故仅用于实验室、手术室空气及物体表面的消毒灭菌。
【注意事项】
杀菌波长的紫外线对人体皮肤,眼睛有损伤作用,使用时应注意防护。
九、滤过除菌
【原理】
滤过是一种机械除菌法,主要用于一些不耐高温液体的除菌,例如:血清、毒素、抗毒素、药物等。但滤过不能除去病毒、支原体和L型细菌。
【材料】
1. 待滤的血清肉汤(烧瓶分装、有菌)。
2. 肉汤管
3. 滤器(已灭菌)和过滤装置、无菌刻度吸管和试管等。
【方法】
1. 无菌取一环待滤血清肉汤接种于肉汤管内。
2. 将烧瓶中的血清肉汤倒入滤斗,启动抽气机,减压抽滤。滤毕,关闭抽气机。迅速以无菌刻度吸管吸取瓶中滤液,移置于无菌试管中。
3. 无菌取一环滤液接种于另1管肉汤。
4. 将2管肉汤置37℃培养18~24小时。
【结果】
接种待滤血清肉汤的管呈混浊,接种已滤血清肉汤的管澄清。

 

 


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