一、自然沉降法 检查空气中的细菌
【材料】
普通琼脂平板。
【方法】
取普通琼脂平板一个，打开皿盖，让培养基直接暴露于空气中，置于实验台上或需要测定的地方15~30分钟。盖上皿盖，用记号笔或蜡笔注明放置地点、实验日期和实验者班级、姓名等，放入37℃温箱培养18~24小时，观察细菌的生长情况和数量。并分析其意义。
二、倾注法检查水中的细菌
【材料与方法】
1. 用无菌吸管吸取胜0.5ml水样加入肉汤培养基中。
2. 另取一支未接种的肉汤管做对照，与上管一起置于37℃温箱培养18~24小时，观察结果。
【结果】
对照管应透明清亮，试验管变混浊，说明水样中有活菌存在。并可通过比浊法估计细菌生长繁殖后的数量。
三、人体体表及各种物品表面的细菌检查 — 拭子法和涂抹法
【材料】 普通琼脂平板。
【方法】
取普通琼脂平板一个，在平板底面用记号笔或蜡笔将平板分成若干等份，于每份培养基表面分别用手指、衣物、书本、笔等轻轻涂抹（不要擦破培养基）。也可用无菌生理盐水擦洗衣物等，用无菌棉拭子涂于培养基表面，盖上皿盖,分别标记清楚。置37℃温箱培养18~24小时观察结果。观察各种物品中细菌的数量及类别，并分析其意义。
【注意事项】
本实验检出的除细菌外，尚可能有真菌、放线菌等，请注意加以区别。
四、人咽喉部位的细菌检查
【材料】 血液琼脂平板。
【方法】
1. 咳碟法
取血液琼脂平板一个，打开皿盖，将培养基面置于口腔前约10厘米处，用力咳嗽数次（让飞沫落在培养基表面），然后盖上皿盖，注明被检查者姓名、实验日期等。置37℃培养18~24小时观察结果。观察细菌的数量、种类等，注意是否有溶血环，并分析其意义。
2. 试子法
用无菌棉签涂取扁桃腺两旁的分泌物，在血琼脂平板表面涂布成线，然后改用接种环，作分区划线接种，置37℃培养18~24小时观察结果。观察细菌的数量、种类等。注意是否有溶血环，并分析其意义。
五、化学因素对细菌的影响（化学消毒剂的杀菌试验）
【材料】
1. 菌种：葡萄球菌18~24小时琼脂斜面培养物。
2. 培养基：普通琼脂平板。
3. 化学消毒剂：5%石炭酸、2%碘酒、70%酒精、0.1%升汞。
4. 其他：直径0.6cm无菌圆形滤纸片、小镊子、接种环等。
【方法】
1. 将琼脂平板分为四等分，并在其底面做标记。
2. 用接种环取葡萄球菌琼脂斜面培养物，密涂于整个琼脂培养基表面。
3. 用小镊子夹取无菌小滤纸片，分别蘸取上述消毒剂（消毒剂不宜蘸得过多，防止外流）。平贴于各相应分区的中央，盖上皿盖，标明日期和试验者。
4. 置37℃培养18~24小时后观察各种化学消毒剂的杀菌作用。纸片周围无细菌生长的区域，称为抑菌圈，分别测量四种消毒剂抑菌圈的直径，以毫米为单位记录之。
六、细菌的药物敏感试验
【材料】
1. 菌种：大肠杆菌，葡萄球菌18~24小时琼脂斜面培养物。
2. 培养基：普通琼脂平板。
3. 分别含各种抗生素的直径0.6cm的圆形纸片（青霉素、链霉素、红霉素、庆大霉素、卡那霉素）、小镊子等。
【方法】
1. 取琼脂平板两个，每个平板分为五等份，并做相应标记。
2. 用接种环分别密涂大肠杆菌及葡萄球菌于两个琼脂平板培养基表面。
3. 用小镊子以无菌操作技术先夹取一无菌不含抗生素的滤纸片平贴于平板中央，再分别夹取含抗生素的各种滤纸片平贴于各相应区中央，盖上皿盖。注明班级、姓名、日期等。
4. 置37℃培养18~24小时，观察各种抗生素的抑菌情况。
5. 抑菌程度判定：
抑菌程度的判定是依照滤纸片周围细菌的生长与抑菌圈直径大小来判定。
《附录》
抗生素滤纸片的制备方法
1. 取直径0.6cm园形滤纸片，每100片置于一小平皿中，15磅灭菌20分钟，再置于烤箱（60~100℃）烘干。
2. 取一定浓度的不同抗生素（见表1）分别注入装有无菌滤纸片的小平皿内，每100片加入1ml抗菌素，浸泡半小时后，再置37℃温箱中2~3小时干燥。干燥后保存冰箱备用。有效期约一年左右。
表1 常用几种抗生素的浓度表
| 抗生素名称 |
浓度（每毫升） |
标记字样/符号 |
| 青霉素 |
200μ |
青（P） |
| 链霉素 |
1mg |
链（S） |
| 红霉素 |
1mg |
红（E） |
| 卡那霉素 |
200μ |
卡（K） |
| 庆大霉素 |
40μ |
庆（G） |
七、噬菌体的噬菌作用
噬菌体（bacteriophage）具有严格寄生性，对相应的易感细胞，具有高度的种特异性和型特异性。感染细胞后，或者裂解宿主细胞，或者处于溶原状态。可应用噬菌体作细菌的鉴定、分型、检查未知细菌和防治某些疾病。
【材料与方法】
1. 噬菌体的溶菌现象
（1）取4支肉汤管，2支接种金黄色葡萄球菌，2支接种大肠杆菌。
（2）将上述两种菌肉汤管各取1支，分别加入金黄色葡萄球菌噬菌体肉汤液0.2ml。
（3）将上述4支肉汤管，置37℃培养6~12小时后观察结果。
2. 噬菌体的溶菌斑
（1）取普通琼脂平板1只，分为4等分，注明①、②、③、④。
（2）用无菌棉签在①、②处涂布接种痢疾杆菌，在③处接种大肠杆菌，在④处接种白色葡萄球菌。
（3）在②、③、④处各加1小滴痢疾杆菌噬菌体肉泌液，在①处加1滴肉汤。
（4）置37℃培养16~18小时后观察结果。
【结果】
1. 溶菌现象 加有噬菌体的金黄色葡萄球菌肉汤管清亮，其余均混浊。
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