细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
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细胞内细胞因子的流式细胞仪检测

点击:   作者:   来源:  时间: 2007-04-09  本站论坛
">克隆。最近发现,在外周血白细胞中,除CD4淋巴细胞外,CD8细胞也存在Th1Th2样细胞因子谱的变化,甚至酸性粒细胞也具有产生多种细胞因子的能力,如酸性粒细胞可分泌IL-4IL-5IL-1αIL-6IL-8TNFαTGF等。因此单纯通过细胞因子谱的变化难以有效识别Th1Th2细胞。

根据T辅助淋巴细胞(CD4)分泌的细胞因子谱(cytokine profiles)的不同,CD4细胞分为Th1Th2亚群。Th1细胞主要分泌γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-β(TNF-β),介导细胞免疫应答;而Th2细胞主要分泌IL-4IL-5IL-10IL-13等因子,促进抗体的产生,介导体液免疫反应。在多数免疫反应中,T辅助淋巴细胞并不产生典型的Th1Th2细胞和相应的细胞因子,而主要是由Th0细胞分泌的混合型的细胞因子。但在疾病的状态下,Th0细胞受特异抗原的刺激时,一方面向Th1方向发展,另一方面可能向Th2方向发展。如在结核感染转状态下可产生Th1Th2双向免疫反应,在I型超敏反应疾病时主要产生以Th2为主的免疫反应。近几年来研究发现,Th1/Th2平衡失调参与多种疾病过程,如肿瘤免疫、移植免疫及变态反应等,而用流式细胞仪进行Th1/Th2的检测克服了传统方法所得结果为整个群体分泌数值不能区分单个细胞或亚群的反应的不足,通过表面染色多参数分析可以区分表达特定细胞因子的细胞亚群。一般用CD3 /CD4 CD3 /CD8-作表面标记,选择相应的荧光标的抗体,Th1Th2细胞分泌细胞因子的情况如下:

全血标本经过刺激培养、表面标记、固定、破膜、胞内染色(

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