通透后细胞在胞内染色前未洗
按操作程序通透后洗细胞再胞内染色
背景染色太高
荧光单抗不纯或荧光与抗体结合不牢导致解析出的荧光染料非特异结合
使用R&D 试剂
使用试剂阻断Fc受体可以有效减少非特异荧光染色，详见Fc段受体阻断节
抗体与固定后的胞内抗原亲和力低，需提高抗体浓度。
使用R&D试剂并按推荐剂量
错误的同型对照，对照Ig浓度过高
按R&D推荐量使用R&D匹配的同型对照试剂
严重的细胞损失
洗涤离心步骤丢失细胞
固定通透的细胞离心500g
固定后细胞密度低于活细胞，需用高转速离心。
加样步骤丢失细胞
弃上清带走细胞
小心吸样
溶血不完全
PMA Ionomycin激活
按操作步骤用FL3做阈值去除碎片和未溶细胞
PMA可稳定红细胞膜，PMA I激活全血较难溶
溶血未在室温进行
在室温进行溶血
Th1/Th2细胞研究方法
尽管目前提出了较多的 Th1/Th2细胞表面标志，但根据淋巴细胞因子谱的异同识别Th1和Th2细胞仍然是目前最有效的手段，特别是细胞内因子标记的流式细胞技术。近来由于细胞因子ELISA试剂盒的不断涌现，为研究Th1/Th2细胞因子谱的变化提供了准确、可靠、快速的测定方法。但研究CD4 淋巴细胞细胞因子谱变化时需要将T淋巴细胞特异克隆上一篇：流式细胞术定量检测细胞凋亡的3种方法研究比较 下一篇：动物生理学实验仪器参数配置表 共15页: 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] 10 [11] [12] [13] [14] [15] 下一页
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