一、细胞培养
高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不适就要死亡。所以细胞培养技术(cell culture)就是选用最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术。
动物细胞的生存环境与植物细胞差别很大,因而二者的培养方法很不相同。
(一)动物细胞培养
细胞培养方式大致可分为两种(图2-25):一种是群体培养(mass culture),将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中,让细胞贴壁生长,汇合(confluence)后形成均匀的单细胞层;另一种是克隆培养(clonal culture),将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中,各个细胞贴壁后,彼此距离较远,经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落,称为克隆(clone)。一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。此外,为了制取细胞产品而设计了转鼓培养法,使用大容量的圆培养瓶,在培养过程中不断地转动,使培养的细胞始终处于悬浮状态之中而不贴壁。

图2-25 群体培养(左)和克隆培养(右)
表2-3 目前实验室中常用的几种细胞系
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细胞系名称
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细胞类型
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来源
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3T3
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成纤维细胞
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小鼠
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HeLa
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宫颈癌上皮细胞
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人
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BHK21
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成纤维细胞
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叙利亚仓鼠
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PtKl
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上皮细胞
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袋鼠
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L6
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成肌细胞
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大鼠
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PCI2
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嗜铬细胞
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大鼠
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SP2
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浆细胞
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小鼠
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SP2/0
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骨髓瘤浆细胞
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小鼠
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CHO
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卵巢细胞
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中国地鼠
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