【实验目的】
学习和掌握根尖细胞压片技术; 观察植物细胞有丝分裂过程和染色体的形态特征动态变化 。
【实验原理】
有丝分裂是真核生物细胞分裂的基本形式。也称间接分裂或核分裂。在这种分裂过程中出现由许多纺锤丝构成的纺锤体,染色质集缩成棒状的染色体。1882年W.弗勒明最先将此种分裂方式命名为有丝分裂。通过有丝分裂,作为遗传物质的脱氧核糖核酸(DNA)得以准确地在细胞世代间相传。通过有丝分裂和细胞分化才能实现组织发生和个体发育。有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式。它是一个连续过程,可分为前期、中期、后期、末期。植物根尖有丝分裂旺盛,操作和鉴定方便,故一般采用根尖作为实验材料。
【器材与试剂】
一、器材
光学显微镜、水浴锅、载玻片、盖玻片、镊子、烧杯、培养皿、
二、试剂
0.01%—0.2%秋水仙碱、卡诺氏固定液(乙醇:冰醋酸=3:1)、改良品红、1N 盐酸
【实验步骤】
1、材料准备:培养洋葱鳞茎,当根尖长到1.5—3.0厘米时,剪下备用。
2、预处理:用0.01%—0.2%秋水仙碱溶液处理2—4小时。
3、固定:上述根尖放于卡诺氏固定液中固定24小时后,转入70%酒精中,于冰箱中冷藏,可存半年。
4、水解分离(解离):根尖漂洗后放入往已经在60℃水浴中预热的1N 盐酸中,在60℃恒温下解离15分钟后,蒸馏水漂洗2—3次。
5、染色与压片:取上述根尖置于载玻片中央,用镊子切成薄片(约0.5毫米),加一小滴改良品红染液,约2~5分钟后加盖玻片。吸水纸放在盖玻片上,用拇指轻轻在吸水纸上对根尖部位用力,使材料分散均匀。
6、镜检:低倍镜下观察,选出典型细胞,再于高倍镜下观察。
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