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骨髓细胞染色体标本的制备

点击： 作者： 来源： 时间： 2006-11-07 　本站论坛

一、原理
骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者，特别是慢性或急性粒细胞性白血病，因为骨髓反映粒系统细胞增生情况，这些病人不宜用外周血。即
使是淋巴细胞性白血病，也不主张用外周血，因为加PHA刺激外周血培养，只能获得正常淋巴细胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体
改变。
骨髓细胞属不断增殖的细胞，培养可分短期培养和直接制片法，无论哪种其培养液中均不需加PHA。
二、用品和试剂
同外周血染色体制备。
三、操作步骤
（一）短期培养法
1．取材、培养：从髂骨取骨髓液0.2—0.5ml，无菌注入装有5ml培养液的培养瓶中，37℃培养23—25小时后，加入秋水仙碱（终浓度为0.07μg/
ml），继续培养3—4小时，收获。
2．染色体制片：低渗、固定、制片及染色同实验一。
（二）直接制备法
1．从髂骨抽取0.3—0.5ml，立即注入浓度为0.07μg/ml的秋水仙碱的生理盐水5ml中，以吸管轻轻吸动，将骨髓中脂肪颗粒充分吸掉，1000rpm
离心8分钟，弃上清。
2．加入同样浓度的秋水仙碱生理盐水2—3ml，室温放置2—3小时，离心弃上清。
3．染色体制片：低渗、固定、制片及染色同外周血染色体制备。

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