在基因功能研究过程中,常常使用的一种方法就是将目的基因转到靶细胞内进行瞬时表达( transient expression ),以流式细胞仪检测细胞周期的变化,观察转基因对细胞增殖的影响。由于各种转基因方法的不同,转基因的效率也不同,往往是仅有一部分细胞可以表达目的基因
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  • 表达EGFP的质粒和目的基因共转染用于检测目的基因对细胞周期的影响

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-12-17    本站论坛
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伪狂犬病毒野生型蛋白Us9和人定形素spectrinpleckstrin同源结构域均是一种膜定为信号肽,Kalejta RF等的研究表明这些膜定为信号肽与GFP组成融合蛋白后,对转基因细胞的周期没有明显的影响,结合我们的研究结果,说明二者用于该方法是非常安全可靠的。Kalejta RF等的研究表明Us9-EGFP融合蛋白其GFP的膜结合较EGFP-spectrin更牢固,即使在75%的乙醇固定24小时,其GFP阳性细胞也没有显著下降,因而更适合该方法。我们的研究发现Us9-EGFPEGFP-spectrin均能较好的在细胞内维持,因此,均可用于该方法。究竟采用Us9-EGFP还是EGFP-spectrin更好,可能与这两种蛋白在不同的细胞系的表达强弱有关,可以比较后选择。在病毒载体或质粒载体等转基因方法研究基因功能时,若载体内同时含有

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