4℃避光染色1小时。利用该型号流式细胞仪具有区分黏附成团细胞的功能,以CellQuest软件获取细胞。GFP和PI的检测分别采用FL1通道(530/30nm)和FL2通道(572/26nm)。采用单纯标记PI的细胞、单纯表达GFP的细胞和表达GFP同时PI染色的细胞进行FL1和FL2通道的荧光补偿调节。FL1通道采用对数值,FL2通道采用线性值。以CellQuest和Modifit LT软件进行细胞周期分析。在FL2-width和FL2-Area散点图设门,区分单细胞和聚集成团细胞,以FL1直方图设门分析GFP阳性细胞,以FL2-Area直方图分析细胞周期。
2 结果
2.1 75%乙醇固定后对细胞绿色荧光蛋白的影响
三种质粒pBB14、pCMVEGFPspectrin、pEGFPN-1在和pSP72质粒共转后48小时荧光显微镜下观察均可见到绿色荧光。流式细胞仪检测对照管和固定管的绿色荧光蛋白表达,典型结果见图1。pBB14、
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