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CHO细胞表达系统与酵母细胞表达系统比较

点击： 作者： 来源： 时间： 2007-11-10 　本站论坛

   ①毕赤酵母与人及其它物种一样对所使用的氨基酸密码子具有不同的偏好性，这可能限制其蛋白质翻译速度。比较 110种酵母基因密码子使用情况发现，所有基因可分为明显的两组：高表达组和低表达组。高表达组基因的密码子相应的tRNA也明显高于低表达组，第三位密码子为胞嘧啶的比例也明显升高，AT含量则比较低。鉴定酵母和人类使用频率最低的密码子发现：8个低频密码子中有6个是一样的，无论大肠杆菌，果蝇，还是酵母和人类，大量表达的蛋白基因中低频密码子则明显减少，低频密码子含量高的蛋白质大量表达都是对其自身有害的。为了在毕赤酵母中表达HIV-2外壳糖蛋白gpl05，Zhang YJ等将低频密码子AGG突变为同源的CGA，编码天冬氨酸的GAT突变为编码谷氨酸的 GAA，并引入了酵母偏好的TCC，最终实现了gpl05在其中的高表达；
   ②当整合拷贝数增多后，可能在转录水平产生后生(Epigenetic)的调节，影响重组蛋白产率的提高；
   ③转录提前终止，这主要是因为AT含量过多引起的。据报道HIV．1 gpl20就是因为在AT丰富区因转录提前终止而不能在毕赤酵母中表达，在酿酒酵母中有一些共有序列，类似于HIV-1gpl20中引起转录提前终止的AT丰富区域，如：TTTTATA，当改变这些序列后，就可发现更长的mRNA出现。

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