当然,大规模培养条件和无血清及无蛋白培养条件的探索也是与哺乳动物细胞表达系统密切有关的问题,但这是属于另一领域的课题。其中值得提及的是研究某些生长因子基因在导入哺乳动物细胞后,其表达产物有可能使细胞脱离血清生长,这一途径对于哺乳动物细胞基 因工程具有很大的吸引力。
我国在哺乳动物细胞表达系统方面研究不多,在乙肝表面抗原、tPA、生长激素等方面均有单位在研究中,表达水平也有高有低。我属现有的基因工程基础研究水平有很大局限性,故不可能去发展新的表达系统,但利用现有的基因元件,选择合适的载宿主系统以提高表达水平却是有现实意义的。今后应注意以下几方面的研究:
①提高cDNA表达水平的途径。因多数克隆的基因多是cDNA,尤其对于基因组很大的基因,只能用eDNA进行表达。
②探索提高基因剂量的非dhfr放大途径,如采用tk、ada或MT放大的可行性。
③利用若干能使外源基因产物在转晕后稳定性提高的基因元件或有利于此过程的宿主细胞。
④利用附加体(即染色体外基因)与整合在染色体上的基因,这两类外源基因在同一细胞中可以有共存性这一性质来大幅度提高外源基因的表达水平。这是新近国外发展的一种表达系统,值得进一步研究。
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