反复冻融实际上最好与超声波破碎或酶解一起使用,否则冻融后黏度很大,蛋白质容易聚集,通常都是反复冻融后超声波处理,这样效果比较好<br />你问的几个问题其实都没有具体答案,缓冲液,温度等都与具体蛋白质,具体实验要求有关,次数是基本达到你的要求即可
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