细胞调亡的研究方法:琼脂糖凝胶电泳
网站地图本站论坛
高级搜索收藏本站
 
 当前位置:试验方案>细胞生物学>细胞基础> 正文

[1]

<

上一篇:细胞调亡的研究方法:用荧光激活的细胞分类仪   下一篇:细胞介导细胞毒作用检测法7:单细胞CMC试验

细胞调亡的研究方法:琼脂糖凝胶电泳

点击:   作者:   来源:  时间: 2006-11-09  本站论坛

琼脂糖凝胶电泳检测调亡细胞

1.用不同方法诱导细胞调亡后,取106调亡细胞,置1.5ml离心管中,用PBS洗涤一次。在微量离心机上全速离心5秒钟,去上清液。加入100μl含5mol/L异硫氰酸胍,100mmol/L 2-巯基乙醇的25mmol/L枸橼酸钠缓冲液pH7.0,在旋涡混悬器上混悬20秒钟,破坏细胞,变性蛋白质。

2.加入50μl含7.5mol/L醋酸氨和0.8mg/ml糖原的水溶液,混匀;加入300μl 100%乙醇,4℃保存过夜。

3.在微量离心机上全速离心30分钟,去上清液。加入75%乙醇同样离心洗涤沉淀物2次。用20μl含100μg/ml无DNA酶的RNA酶的TE缓冲液消化RNA,37℃ 30分钟。加入10μl甘油和少量溴酚蓝,直接点样。

4.用50ml TAE溶解2g琼脂糖,加入0.25μg/ml溴乙啶。倒板后加样,用100bp DNA标记物作为标记。25mV电泳过夜。在紫外线下观察结果。调亡细胞的DNA呈相差200bp的条带的梯形图。

 
推荐文章
 
相关文章
·细胞调亡的研究方法:用荧光激活的细胞分类
·细胞介导细胞毒作用检测法7:单细胞CMC试验
·用淋巴细胞分离液分离单个核细胞
·细胞介导细胞毒作用检测法6:荧光法检测CMC
·培养细胞中RNA检测-Northern Blot
·细胞介导细胞毒作用检测法5:用MTT检测法测
·蛋白质检测-Western Blot
·细胞介导细胞毒作用检测法:时间分辩荧光分
·基因性状的其它检测方法
·细胞介导细胞毒作用检测法:LDH释放法
·杂交瘤细胞的制备
·细胞介导细胞毒作用检测法:[3H]脱氧胸苷释
·酵母的高效转化
·细胞介导细胞毒作用检测法1:Cr释放法
·酵母菌落直接质粒转化法
·细胞介导的细胞毒作用(CMC)检测法:细胞
·酵母遗传学方法1:DNA分离
·细胞生长检测10:直接计数细胞
·酵母遗传学方法2:蛋白质的抽提
推荐专题


↑返回顶部   打印本页   关闭窗口↓  
 本站申明 联系我们 网站地图
Copyright© 试验方案

Powered by DedeCms email:htmyth#yahoo.com.cn

Optimized to 1024x768 to Firefox,Opera and MS-IE6