酵母遗传学方法11：PCR介导基因破坏法
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酵母遗传学方法11：PCR介导基因破坏法

点击：   作者：   来源：  时间： 2006-11-09 　本站论坛

PCR介导基因破坏法

1．反应混合物：

5μl             10×Taq缓冲液

5μl             25mmol/L MgCl2

2μl             10mmol/L dNTPs

10~100ng         模板DNA

25pmols          引物（每种引物）

0.5μl            Taq DNA聚合酶（2U）

2．PCR循环参数：

94℃          5分钟

94℃          1分钟

55℃          1分钟

72℃          2分钟

10个循环

94℃          1分钟

65℃          1分钟

72℃          2分钟

20个循环

72℃          10分钟

 

[1]

　
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