• 细胞表面抗原染色的组织样本制备方法

• 点击：    作者：   来源： 日期：2006-11-09    本站论坛

该方法适用于新鲜和冷冻标本

1.将组织(10-20mm)切成1-2mm的碎片，用缓冲液或培养液浸湿。
2.用1ml缓冲液或培养液预洗Medicon 二遍。
3.将组织和1ml缓冲液或培养液放入到Medicon中，盖上盖子，将Medicon 插入到Medimachine中。
4.降解组织。降解组织的时间长短依赖于组织类型。(参见降解时间表)。
5.用注射器通过 Medicon上的注射器接口将上清吸去。
6.用1ml缓冲液或培养液冲洗Medicon三遍。
7.选择适当大小孔径的Filcon 滤器过滤细胞悬液。(50-mmFilcon 适用 于大 多数组织，如：淋巴结、肿瘤组织、皮肤组织)
8.用1ml缓冲液或培养液冲洗Filcon三遍。
9.250g离心细胞悬液5分钟。
10.用适当的缓冲液或培养液重悬细胞沉淀。
11.若需要，重复3－10步骤。
12.调节细胞浓度至5×105－1×106/ml。
13.用适当浓度的抗体在2－80C与100ml细胞悬液孵育15-30分钟。
14.加2ml 冷的缓冲液或培养液(2－80C), 250g离心5分钟。
15.用缓冲液或培养液重悬细胞沉淀。
16.分析样本。

注意：

1.在处理和接触有感染危险性生物样本时，应根据相关法规处理 废液。避免皮肤或粘膜接触样本。勿用嘴移液。
2.该方法虽经验证，但客户需根据自己实验室条件及所处理的组织 类型进行适当调整。

降解时间表：