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实验性细胞移植：临床前及临床研究

点击： 作者： 来源： 时间： 2006-11-07 　本站论坛

人们曾以极大的努力来开展细胞移植以修复心脏和血管组织，但仍有许多问题尚待解答。还需要实验研究方面的进一步实验，需要仔细评估临床工作。本单元交流了这两方面的探讨。
（一）K Pinkornell报告从切下的皮下脂肪选择。细胞通过培养方法选择，可以在标准条件下生长。比较直接分离出来后的基线状态和培养30天之后的基因表达。基因表达分析集中于肌节（Sarcomeric）基因和与心脏有关的转录因子。分析表明TnT、Titin：MLC2a，MLC2v NKX2.5和GATA4等基因，在7天后已有表达。免疫细胞化学检查发现少数表达Titin和肌钙蛋白的细胞有些肌节组成。这些细胞转染了eGFP，注射入缺血再灌注猪模型。早期资料提示GFP（用抗体检查出来）和肌钙蛋白一同表达。资料是初步的，但在细胞移植后有保全心壁厚度的趋向。如果还没有十分的说服力的话，提示注射的有益效应，甚至可能有新心肌细胞形成。但从结果看是有前途的，需要进一步、更广泛的继续观察。
（二）N Werner（法）报告试图识别出对再内皮化最重要的细胞。从脾分离出单核细胞，根据膜蛋白CDIIb的表达选择。比较CDIIb+及CDb-两种细胞组分与内皮祖细胞阻止内膜形成的潜能。体内实验用颈动脉剥脱形成的血管损伤模型。治疗为注射106个细胞共2次（相隔24小时）。7天后评估结果，首次研究表明，用未经选择的单核细胞阻止新生内膜形成优于CDIIb-或安慰剂。第二项分析比较内皮祖细胞、单核细胞和CDIIb组分，反映单核细胞注射有很强效应，CDIIb+细胞和内皮祖细胞稍有效应。上述结果提示，最佳内皮内生长过程中，各种不同的未分化细胞均必不可少。
（三）Muller-Ehmsen用实时PCR方法和大鼠梗死模型检查移植单核细胞和间充质的生存情况。接受移植者为雌性大鼠，供者为雄性大鼠。实时PCR检出基于Y染色体的识别。细胞注射入疤痕和心肌梗死的边缘区进行多种比较，包括细胞数（105，106和缺血损伤后的日数），结果反映注射后数小时内生存率高（35%），但6周后很快降低至极低（±1%）。单核细胞和中膜的资料相近似。细胞数增加并不改变生存组分，但增加（按逻辑）绝对数。随后较迟的注射，生存情况差。用胎盘-生成生长因子孵育细胞，防止凋亡，对生存率无大作用，这些都是分析生存情况的较为过硬的方法，这些结果十分持重、冷静，它迫使我们重审一些注射临床试验报告的阳性结果的解释。
（四）Seger（比）报告离体研究微循环内皮细胞和间充质之间的相互作用的结果。TNF-1使细胞粘附，用VCAM处理两种细胞能阻断这种粘附。TNF-处理两种细胞亦能亦生成VCAM，值得注意。加服Fluvastatin和舒降之亦阻断这些细胞型之间的相互作用。
（五）T Siminiak（波兰）报告的人体研究，值得注意。他用III-indium-oxinate标记CD34+。注射细胞入心梗后病人的梗死相关动脉。影像结果反映标记细胞10mg于心脏（1-10%），脾及肝（3-17%），所注射细胞活性的50%以上不能重现。这是在体内目察人重要的一步。
（六）W Wojakowski心肌梗死后细胞因子释放的自然情况和的动员收集56例AMI病人和39例稳定性心绞痛病人的资料，心梗后开始动员，入院时达峰值。SDF-1的释放与之相近似。有年青（意外地）、LV功能不良、以前有过MI史，NT-proBNP和TnI水平高等因子者数少，值得注意，或细胞因子何时干预最妥？这是今后这方面的一项关键性研究。
总之，这是一次十分扎实的交流，学术性极强，几位报告者从不同角度说明这一领域正通过世界各国间协作而前进。这些资料对研究前进至新水平极其重要，因为它们辨识着细胞移植治疗中的“可行”和“不可行”。
（P. Doevendans（荷）整理；余国膺译）

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