⑶ 消化：玻片浸于盛有蛋白酶K消化液的染色缸，室温下消化15min，洗涤
同上。
⑷ 平衡处理：将细胞或组织周围液体用吸水纸吸干，滴加平衡缓冲液（按70µl／cm2）覆盖细胞或组织表面，盖上塑料盖玻片，室温下作用5min～10min。
⑸ 反应：移去盖玻片，倾去平衡液，用吸水纸吸干周围液体，滴加反应液（按50µl/㎝2，18μl TdT酶 36μl反应缓冲液），均匀覆盖在细胞或组织上，盖上塑料盖玻片，置于湿盒中，37℃温育1h。
⑹ 终止反应：移去盖玻片，将玻片置于盛有终止/洗涤液的染色缸内，37℃下洗涤30min（置摇床上振摇）。然后将玻片置于洗涤缓冲液内，洗两次，每次5min。
⑺ 地高辛抗体反应：用吸水纸吸干细胞或组织周围液体，滴加70μl过氧化物酶标记的地高辛抗体，均匀覆盖，加上塑料盖玻片，室温下置于湿盒中，孵育30min。
⑻ 洗涤：置于洗涤缓冲液内，洗两次，每次5min。
⑼ 用吸水纸吸干细胞或组织周围液体，滴加新鲜配制的DAB显色液，均匀覆盖，加上塑料盖玻片，室温下作用3min～6min。
⑽ 洗涤：置于蒸馏水中洗涤3次，每次3min～6min。
⑾ 套染：将玻片置于盛有甲基绿染液的染色缸中，室温染色10min。
⑿ 洗涤：蒸馏水洗涤3次（置于摇床上），每次2min。
⒀ 脱水、封片：100%正丁醇，3次，每次2min。二甲苯，3次，每次2min。
明胶甘油封片。
4．结果判定 光学显微镜下观察，所有的细胞核均着绿色，凋亡的细胞核染
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