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  • 用寡核苷酸探针检测组织切片中的RNA原位杂交

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-04-04    本站论坛
.
(
)原位杂交的对照
原位杂交流程中阴性对照设定: ER mRNA,PR mRNA的阳性组织片中,在杂交过程中加杂交
液不加探针,在免疫检测中不加Streptavidin-AP,其结果均为阴性.
注意事项
1.
阳性对照对已知含有丰富靶mRNA的组织和细胞和不含有靶细胞mRNA的组织和细胞作对
.技术控制包括遵守正确的实验操作和注意事项和不正确实验操作之间的对照.对组织中
mRNA
保存,RNA和寡核苷酸探针及各种缓冲液配制出现的不应该阳性和阴性结果比较.
2.
阴性对照对已知缺靶mRNA的组织和细胞为阴性对照.技术控制包括:靶细胞在原位杂
交过程中用RNA酶消化靶mRNA,靶组织的细胞内应无阳性结果检出,杂交用敏感的探针和无
关探针应出现差异,检测省略标记探针或略去抗地高辛抗体均为阴性结果.

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