2.在每 1 ml Buffer RLT 中加入10 ml β-ME (加入β-ME的Buffer RLT可在室温下放置1月)。
3. Buffer RPE中加入4倍体积的96－100％乙醇。
4.在 550 ml 的去RNA酶的水中加入1500 Kunitz单位的DNA酶1，轻轻翻转试管混匀，勿振荡（溶好的DNA酶1分装后，－20℃可放置9个月，2－8℃可放置6周）
5.当细胞数少于5000个，须在匀浆前在溶液中加入载体 RNA。 首次用时，在1ml 去RNA酶的水中加入 310 ug 载体RNA，则载体RNA的浓度为310 ug/ul，置－20℃保存。 实验时所需浓度为4ng/ul，配制如下：取5 ul 浓度为310 ug/ul的载体RNA，加入34 ul Buffer RLT，吹打混匀，再取 6 ul 稀释液加入54 ul Buffer RLT，得终浓度4 ng/ ul，加5ul到第3步的溶液中。
