概括地说， 引物应符合下列条件：
引物长度为15-30bp, 过长过短会降低特异性;
碱基随机分布,G C%含量宜在45-55%左右;
引物内部不应形成二级结构,两引物之间不能互补;
引物3`端碱基最好选T,C,G而不选A,这样有利于延伸;
为了便于后续的克隆可以在5`端加保护碱基和酶切位点。
得到一套好的引物后, 下一步任务是制备好的核酸模板。
2．TaqE
DNA的体外扩增是由许多不同来源的DNA聚合酶完成的。Saiki等（1985）描述过的最早PCR过程是用E.coli DNA聚合酶I的Klenow片段来完成的.由于这种酶热稳定性差,所以每一轮循环在变性和退火后需加入新酶。后来在PCR中引入耐热性的TaqE （Saiki et al. 1988）避免了这种烦琐的操作，使热循环部分的自动化成为可能。
TaqE 没有3`-5`外切酶校正功能,所以错误掺入率为2×10-4,而且在3`端引入非模板互补核苷酸A,从而克隆时需用T-vector。rpfu DNA聚合酶亦称重组Pfu DNA 聚合酶，是将高温噬热菌Pyrococcus furiosis DNA 聚合酶基因克隆，再转化到大肠杆菌中表达，然后经分离精制而成的高保真耐高温DNA聚合酶。由于其具有独特的5`-3`外切酶活性，与传统的高温DNA聚合酶如Taq DNA聚合酶，Tth DNA聚合酶等相比，Pfu DNA聚合酶具有超强纠错功能。目前国际上已发现的具有校正功能的高温DNA聚合酶有 Vent，Deep Vent ，Tli，Pwo，Pfu，UTTma等，但在扩增DNA时，Pfu DNA聚合酶是所有高温DNA聚合酶在扩增DNA时错误率最低的（1×10-6），它比Taq及其突变体低10倍，比Vent和Pwo低2-4倍。
3．反应缓冲液
主要成分为10-50mmol/L Tris-HCl，50mmol/L KCl，1.5mmol/L MgCl2，其中Mg 2 浓度因能影响引物退火的程度，模板及PCR产物的解链温度，产物的特异性，引物二聚体的形成，酶的活性及精确性而显得极为重要。
4. 模板
可以是基因组DNA,质粒DNA,cDNA,RNA等。
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